產(chǎn)品介紹：
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）。微孔板預(yù)包被小鼠SAA特異性抗體，加入標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本后，樣本中的SAA與固相抗體結(jié)合。隨后加入生物素標(biāo)記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物。加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，催化底物TMB顯色，顏色深淺與SAA濃度正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中的SAA濃度。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠Serum Amyloid(SAA)elisa試劑盒 | 英文名稱 | Mouse Serum Amyloid(SAA) ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A129889 |
試劑盒組成
預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板：用于固相抗體的固定。
標(biāo)準(zhǔn)品：已知濃度的SAA溶液，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
生物素標(biāo)記的檢測抗體：與SAA結(jié)合。
HRP標(biāo)記的鏈霉親和素：催化顯色反應(yīng)。
顯色底物（TMB）：在HRP作用下顯色。
終止液：終止顯色反應(yīng)。
洗滌液：用于洗滌未結(jié)合的試劑。
樣本稀釋液：用于稀釋待測樣本。
檢測范圍與靈敏度
檢測范圍：通常為31.25-1000 pg/mL。
靈敏度：最低檢測濃度為245 pg/mL。
操作步驟
準(zhǔn)備試劑和樣本：按說明書準(zhǔn)備試劑，處理樣本。
加樣：將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入酶標(biāo)板孔中。
溫育：在指定溫度下孵育，使抗體-抗原充分結(jié)合。
洗滌：洗去未結(jié)合的試劑，減少背景干擾。
加酶標(biāo)抗體：加入生物素標(biāo)記的檢測抗體和HRP標(biāo)記的鏈霉親和素。
顯色：加入TMB底物，避光孵育顯色。
終止反應(yīng)：加入終止液，終止顯色。
讀數(shù)：使用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定OD值。
計算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中的SAA濃度。
注意事項
樣本處理：血清、血漿需離心處理，避免反復(fù)凍融。
試劑保存：試劑盒需按說明書保存，避免失效。
操作規(guī)范：使用一次性吸頭，避免交叉污染；嚴(yán)格按步驟操作，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。
適用范圍
本試劑盒適用于科研領(lǐng)域，用于檢測小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及相關(guān)生物液體中的SAA濃度，不適用于臨床診斷。
主要優(yōu)點缺點
維度 優(yōu)勢 (Pros) 劣勢 (Cons)
檢測性能 靈敏度極高，特異性強，結(jié)果準(zhǔn)確 可能存在交叉反應(yīng)，易受干擾物影響
操作體驗 流程標(biāo)準(zhǔn)化，無需昂貴設(shè)備，適合高通量檢測 步驟多且繁瑣，耗時較長，對操作技巧有要求
經(jīng)濟成本 適合大批量樣本檢測，長期看性價比尚可 單次試劑成本較高，且不同批次可能存在差異
應(yīng)用范圍 可檢測血清、血漿、細(xì)胞上清等多種樣本 對樣本質(zhì)量（如是否溶血）敏感
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試劑與樣本準(zhǔn)備階段
溫度平衡（最容易被忽視的點）
操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。
后果： 冷試劑直接使用會導(dǎo)致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴(yán)重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結(jié)晶析出。配制時必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標(biāo)試劑和顯色液（如 TMB）對光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。
樣本處理
避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細(xì)胞破裂），會釋放過氧化物酶，導(dǎo)致假陽性或背景過高。
離心去雜質(zhì)： 血液或細(xì)胞上清樣本在加樣前最好進(jìn)行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過高，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，必須進(jìn)行預(yù)實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
關(guān)鍵字： 小鼠;Serum Amyloid SAA;ELISA試劑盒;
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