兔Serum Amyloid(SAA)elisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒用于定量檢測兔血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液及其他生物樣本中的血清淀粉樣蛋白A(Serum Amyloid A, SAA)含量,是研究兔炎癥、感染、腫瘤等疾病機制的重要工具。
英文名稱 | Rabbit Serum Amyloid(SAA) ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號 | A130007 | 規(guī)格 | 48T/96T |
檢測原理
采用雙抗體夾心法(Sandwich ELISA):預先將抗兔SAA抗體包被于酶標板,樣本中的SAA與抗體結合,再加入酶標二抗(如HRP標記),形成夾心復合物。經(jīng)過洗滌后,加入底物(如TMB),在酶催化下顯色,顏色深淺與SAA濃度成正相關。
主要組成
預包被抗體的酶標板
SAA標準品
酶標抗體(如HRP-抗SAA抗體)
樣本稀釋液
洗滌液
顯色底物(TMB)
終止液

操作要點
樣本準備:血清、血漿等樣本常規(guī)處理,組織勻漿需加適量緩沖液并離心,建議做復孔。
標準品稀釋:按說明書梯度稀釋,用于標準曲線制作。
加樣與孵育:分別加入標準品和待測樣本,37℃孵育1小時或4-5小時。
洗滌:充分洗滌3-6次,去除未結合物質。
顯色與終止:加入底物避光反應,終止液終止反應。
讀數(shù):酶標儀450 nm測定吸光度,根據(jù)標準曲線計算SAA濃度。
性能特點
靈敏度高:最低檢測限可達0.5-3.1 ng/ml(不同試劑盒略有差異)
檢測范圍廣:通常為1.56-100 ng/ml或100 ng/ml-1.56 ng/ml
特異性強:與其它相關蛋白無明顯交叉反應
重復性好:批內、批間差均<10%
僅限科研使用:不可用于臨床診斷
該試劑盒操作簡便、靈敏度高、結果可靠,是兔SAA蛋白定量檢測及相關疾病機制研究的優(yōu)選方法,廣泛應用于兔醫(yī)學科研及實驗病理學等領域。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復孔”?
A: 建議每個樣本(包括標準品)都做復孔(2-3個孔)。這樣可以計算平均值,減少操作誤差,提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎?
A: 是的。如果樣本濃度過高,超出了標準曲線的檢測范圍,需要根據(jù)預實驗結果進行適當稀釋。計算最終濃度時,記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結果出現(xiàn)“花板”(背景不均)怎么辦?
A: 可能原因包括:洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑(如底物)受光照分解。請檢查洗板機是否堵塞,確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗證試劑盒的特異性?(實操建議):
稀釋線性實驗 (Linearity):
操作: 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋(如1:2, 1:4, 1:8...)。
預期: 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應呈良好的線性關系(相關系數(shù) R2 ≥ 0.98)。如果線性不好,說明樣本基質中有干擾物影響了特異性結合。
干擾實驗 (Interference Test):
操作: 在已知濃度的目標抗原溶液中,加入高濃度的潛在干擾物(如高濃度的脂質或結構類似物),檢測其對結果的影響。
預期: 若檢測值與理論值偏差在±10%以內,說明抗干擾能力強,特異性好。
回收實驗 (Recovery Test):
操作: 在樣本中加入已知量的標準品,檢測總含量,計算回收率。
預期: 回收率在80%-120%之間,說明試劑盒能準確識別目標,不受樣本背景干擾。
關鍵字: 兔;Serum Amyloid(SAA);ELISA試劑盒;
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