雷丸探針法PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 雷丸探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Omphalia Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR5059 |
預(yù)期用途
用于雷丸核酸的體外定性或定量檢測(cè)，適用于科研用途，不用于臨床診斷。
檢測(cè)原理
基于TaqMan探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，通過靶向雷丸基因保守區(qū)域的特異性引物及熒光探針，實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增與信號(hào)實(shí)時(shí)檢測(cè)。
試劑盒組成
核心組分：
擴(kuò)增試劑：
雷丸反應(yīng)液（含PCR緩沖液、dNTPs、Mg2?等）
雷丸擴(kuò)增液（含特異性引物及探針）
質(zhì)控品：
陽(yáng)性質(zhì)控品（人工合成DNA片段，1×10?拷貝/μL）
陰性質(zhì)控品（無(wú)核酸酶水）
輔助試劑：
熒光PCR專用模板稀釋液
酶混合液（含Taq DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶等，適用于RNA檢測(cè)版本）
注意：
不同批號(hào)組分不可混用。
試劑開封后需避免反復(fù)凍融（建議分裝保存）。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸條件
儲(chǔ)存溫度：-20℃±5℃，避光保存。
有效期：12個(gè)月（未開封）。
運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸（冰袋或干冰）。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀，包括：
ABI 7500/QuantStudio系列
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler
其他支持FAM通道檢測(cè)的設(shè)備。
樣本要求
樣本類型：
動(dòng)物組織（腸道、血液等）
分泌物（糞便、呼吸道拭子等）
病毒培養(yǎng)物
樣本處理：
核酸提取：推薦使用商品化DNA/RNA提取試劑盒。
保存條件：
短期：-20℃
長(zhǎng)期：-70℃（避免反復(fù)凍融）。
實(shí)驗(yàn)操作流程
1. 試劑準(zhǔn)備
解凍后渦旋混勻，離心分裝至PCR管（20μL/管）。
反應(yīng)體系示例：
| 組分 | 體積（μL） |
| 反應(yīng)液 | 19.5 |
| 擴(kuò)增液（含引物/探針） | 0.5 |
| 模板DNA/RNA | 5 |
2. PCR擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 擴(kuò)增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| | 55-60℃ | 30 sec | |
| 信號(hào)采集 | 60℃ | 1 min | |
3. 結(jié)果判讀
陽(yáng)性：Ct值≤35，且擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)。
陰性：Ct值≥40或無(wú)擴(kuò)增曲線。
灰區(qū)（35<Ct<40）：建議重復(fù)檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
污染控制：嚴(yán)格分區(qū)操作（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)）。
質(zhì)控要求：每批次實(shí)驗(yàn)需包含陰/陽(yáng)性對(duì)照。
適用范圍：僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 雷丸;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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