橘核探針法PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 橘核探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Semen Citri Reticulatae Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5067 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于聚合酶鏈式反應(PCR)技術,通過特異性引物和探針設計,實現(xiàn)對橘核(Semen citri reticulatae)DNA的高靈敏度、高特異性鑒定。適用于中藥鑒定、科研分析等領域,僅限科研使用。
核心特點:
即開即用:預混PCR反應液(含Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2?、緩沖液等),用戶僅需提供DNA模板。
高特異性:引物經(jīng)優(yōu)化,僅擴增橘核靶序列,無交叉反應。
質(zhì)控完善:提供陽性對照(1×10?拷貝/μL),便于排除假陰性。
便捷電泳:PCR Mix含上樣染料,擴增產(chǎn)物可直接電泳檢測。

試劑盒組成
| 成分 | 規(guī)格/包裝 | 備注 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(紅蓋) | 含Taq酶、dNTPs、緩沖液 |
| 超純水 | 1 mL(亮黃色) | 稀釋或陰性對照 |
| 橘核引物混合液 | 100 μL(白蓋) | 特異性引物及探針 |
| 陽性對照 | 50 μL(黃蓋) | 1×10?拷貝/μL |
| 核酸釋放劑(試用裝)| 20次(1 mL,綠蓋)| 可選DNA提取輔助 |
| 使用手冊 | 1份 | 含詳細操作流程 |
實驗步驟
1. 樣品DNA制備
使用自選方法或配套核酸釋放劑提取樣品DNA,建議設置陽性對照(10 μL陽性對照1000倍稀釋液)和陰性對照(超純水)。
提取后DNA置于冰上備用,避免降解。
2. PCR反應體系(40μL)
| 成分 | 樣品管(N+2) | 陰性對照 | 陽性對照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| 樣品DNA模板 | 18 μL | — | — |
| 陰性對照(水) | — | 18 μL | — |
| 陽性對照稀釋液 | — | — | 18 μL |
3. PCR程序設置
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 變性 | 95℃ | 15 sec | 35 |
| 退火 | 57℃ | 15 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 40 sec | |
| 后延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
4. 結果檢測
取10-20 μL擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳(2-2.5%)。
預期條帶出現(xiàn)于陽性對照,陰性對照無擴增則為有效實驗。
注意事項
防污染:陽性對照需單獨存放,避免交叉污染。
重復實驗:若樣品無擴增,可稀釋10倍后重新檢測以排除抑制劑干擾。
酶選擇:本試劑盒默認含Taq酶(擴增速度快,產(chǎn)物帶A尾),需高保真可選用Pfu酶(需另購)。
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關鍵字: 橘核;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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