化橘紅探針法PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 化橘紅探針法PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱 | Exocarpium Citri Grandis Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5089 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒專用于化橘紅（Exocarpium citri grandis）的探針法熒光定量PCR鑒定，基于保守序列設(shè)計特異性引物與探針，具有高靈敏度、強(qiáng)特異性和穩(wěn)定性，適用于科研實驗。
產(chǎn)品規(guī)格
規(guī)格：50次/盒（20 μL反應(yīng)體系）
保存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期1年。
運輸條件：低溫避光運輸。
試劑盒組成
PCR反應(yīng)液（含熱啟動Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2?、緩沖液等）
化橘紅特異性引物與探針混合液
陽性對照（86 bp DNA片段，1×10?拷貝/μL）
模板稀釋液
核酸釋放劑（試用裝，可選用于DNA提取）
使用手冊
實驗流程
樣品DNA制備
使用兼容的DNA提取試劑盒（如柱式病毒DNAout）純化樣本DNA。
若使用本試劑盒附贈的核酸釋放劑，按說明書操作裂解樣本并提取DNA。
陽性對照稀釋
標(biāo)記離心管（7至2號），每管加入45 μL模板稀釋液。
梯度稀釋陽性對照（10?~102拷貝/μL），每步換槍頭并充分震蕩，冰上保存。
qPCR反應(yīng)體系配制
| 成分 | 體積（μL） |
| 2× PCR MasterMix | 10 |
| 引物探針混合液 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| 超純水 | 補(bǔ)至20 |
注意：
陰性對照以水替代模板，陽性對照最后加入以防污染。
若使用ABI 7500/7700/7900儀器，需添加ROX校正染料。
PCR擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 1分鐘 | 1 |
| 變性 | 95℃ | 15秒 | 30 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 15秒 | |
數(shù)據(jù)分析
儀器采集熒光信號（激發(fā)光471 nm，發(fā)射光530 nm）。
以陽性對照Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算待測樣本濃度。
注意事項
操作需在獨立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
試劑解凍后需充分混勻，短暫離心后使用。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不適用于臨床診斷。
技術(shù)參數(shù)
檢測限：≤102拷貝/μL
特異性：僅擴(kuò)增化橘紅靶序列，無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：CV值≤5%。
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