降香探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 降香探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Lignum Dalbergiae Odoriferae Probe-based PCR Identification Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR5077 |
產(chǎn)品用途
專(zhuān)用于降香（Lignum dalbergiae odoriferae）的核酸定性及定量檢測(cè)，僅限科研使用。
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開(kāi)即用：用戶(hù)僅需提供樣品DNA/RNA模板，預(yù)混試劑含優(yōu)化引物、探針、酶及緩沖液。
高靈敏度與特異性：引物基于降香保守序列設(shè)計(jì)，避免與其他微生物核酸交叉反應(yīng)。
雙重質(zhì)控：提供陽(yáng)性對(duì)照（無(wú)傳染性DNA片段）和陰性對(duì)照，有效區(qū)分假陰性。
兼容性廣：支持探針?lè)晒舛?/span>PCR，適用于ABI、Roche等主流儀器。
靈活應(yīng)用：可進(jìn)行絕對(duì)定量（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）或定性檢測(cè)（Ct值閾值法）。
試劑盒組成
PCR MagicMix 3.0：含Taq酶、dNTPs、Mg2?及緩沖液（紅蓋，1 mL）
降香特異性引物探針混合液（白蓋，100 μL）
陽(yáng)性對(duì)照（1×10?拷貝/μL，黃蓋，50 μL）
超純水（亮黃蓋，1 mL）
核酸釋放劑（試用裝）（綠蓋，1 mL）
使用手冊(cè)（含標(biāo)準(zhǔn)曲線制備指南）
操作流程
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測(cè)）
梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照（10?-101拷貝/μL），每稀釋度獨(dú)立操作以避免污染。
以log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2需≥0.99。
2. 樣品處理
提取樣品RNA/DNA（兼容柱式提取法或核酸釋放劑）。
設(shè)置N+2個(gè)檢測(cè)孔（含陰性對(duì)照和制備對(duì)照）。
3. PCR反應(yīng)體系（20μL）
| 成分 | 體積（μL） |
| 2× PCR Mix | 10 |
| 引物探針混合液 | 2 |
| 模板DNA/RNA | 2 |
| 超純水 | 補(bǔ)至20 |
4. 擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 3 min
循環(huán)：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（40 cycles，熒光采集）
結(jié)果判讀
定量分析：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品拷貝數(shù)。
定性分析：
陽(yáng)性：Ct≤36，擴(kuò)增曲線呈S型。
陰性：Ct≥40或無(wú)Ct值。
可疑：36<Ct<40，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
運(yùn)輸與保存
運(yùn)輸條件：低溫干冰運(yùn)輸。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
操作分區(qū)進(jìn)行（試劑配制、樣品處理、擴(kuò)增區(qū)），避免氣溶膠污染。
陽(yáng)性對(duì)照需最后加入，防止污染其他反應(yīng)管。
實(shí)驗(yàn)廢棄物需經(jīng)消毒處理后再丟棄。
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