操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Phosphatase Inhibitor 2的核心功能是作為蛋白磷酸酶-1（PP1）的內(nèi)源性抑制劑，通過調(diào)節(jié)PP1的活性來控制細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的磷酸化水平，從而影響細胞周期的進程（特別是G2/M期轉(zhuǎn)換）12。研究表明，該蛋白在睪丸組織中高表達，與精子發(fā)生和男性不育密切相關(guān)。重組Phosphatase Inhibitor 2蛋白是研究PP1信號通路、解析生殖障礙機制以及篩選相關(guān)藥物的重要生物工具。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Phosphatase Inhibitor 2
別名; IPP 2, IPP-2, IPP2, IPP2_HUMAN, MGC87148, Phosphatase inhibitor 2, Phosphoprotein phosphatase, Ppp1r2, PPP1R2 protein, Protein phosphatase 1 regulatory (inhibitor) subunit 2, Protein phosphatase 1 regulatory subunit 2, Protein phosphatase inhibitor 2
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-166
分子量; 18.2 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
骨成型蛋白受體1A抗體 | RASAL2蛋白抗體 |
軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細胞抗體 | 組織磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性熒光定量檢測試劑盒 |
碳酸酐酶7抗體 | 細胞尿素比色法定量檢測試劑盒 |
FCP1蛋白抗體 | ENDOPHILIN蛋白表達檢測試劑盒 |
冰凍切片脂肪組織染色試劑盒 | 載玻片細胞MYC蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 |
植物醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法定量檢測試劑盒 | 飼料（folic acid）含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 |
細菌磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性比色法定量檢測試劑盒 | 麻疹病毒融合蛋白F抗體 |
細胞色素P450亞酶CYP2B6（EFC）活性熒光定量檢測試劑盒 | 對接蛋白4抗體 |
體液基質(zhì)金屬（MMP）總活性熒光定量檢測試劑盒 | 羊抗人免疫球蛋白A |
糞便DNA高質(zhì)純化試劑盒 | 8-羥基脫氧鳥苷抗體 |
PE標記人CD55單克隆抗體 | 磷酸化白細胞F肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 |
動物細胞周期G0期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒 | Recombinant Human Phosphatase Inhibitor 2T細胞表面糖蛋白CD1C抗體 |
肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 | HEXIM2蛋白抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學(xué)家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導(dǎo)其表達。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： Phosphatase Inhibito;18.2 kDa; 1-166;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。