鼠附紅細(xì)胞體（鼠嗜血支原體）探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 鼠附紅細(xì)胞體（鼠嗜血支原體）探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Eperythrozoon coccoides Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5255 |
預(yù)期用途
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于檢測鼠附紅細(xì)胞體（鼠嗜血支原體）核酸，適用于科研領(lǐng)域?qū)Ω腥緲颖镜亩ㄐ曰蚨糠治觯贿m用于臨床診斷。
檢驗原理
采用TaqMan探針技術(shù)，針對病原體基因保守區(qū)域設(shè)計特異性引物及探針。通過實時監(jiān)測PCR擴(kuò)增過程中的熒光信號，實現(xiàn)對靶標(biāo)核酸的高靈敏、高特異性檢測。分析靈敏度可達(dá)100拷貝/反應(yīng)，線性范圍覆蓋5個數(shù)量級。
試劑組成
擴(kuò)增液（25μL/管）
反應(yīng)液（975μL/管）
陽性質(zhì)控品（人工合成DNA片段，50μL/管）
陰性質(zhì)控品（50μL/管）
說明書
儲存與運(yùn)輸
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融（≤7次）。
有效期：12個月。
運(yùn)輸：低溫（-20℃）泡沫箱加冰密封運(yùn)輸。
適用儀器
兼容ABI系列、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等熒光定量PCR儀。
樣本要求
樣本類型：全血、血清、組織（腸道等）、拭子或病毒培養(yǎng)物。
保存與運(yùn)輸：短期-20℃保存，長期需-70℃；運(yùn)輸時使用2~8℃冰袋。
實驗步驟
核酸提?。和扑]使用商品化DNA提取試劑盒，避免交叉污染。
試劑配制：
反應(yīng)體系（20μL/管）：19.5μL反應(yīng)液 + 0.5μL擴(kuò)增液 + 5μL模板DNA。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：6個10倍梯度稀釋的陽性質(zhì)控品（10^1~10^6拷貝/μL）。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 3分鐘；
40個循環(huán)：95℃ 15秒 → 55℃ 30秒（采集熒光信號）。
結(jié)果判讀
陽性：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線典型。
可疑：35<Ct≤38，需復(fù)測確認(rèn)。
陰性：無Ct值或Ct>38。
質(zhì)控要求：陰性對照無擴(kuò)增；陽性對照Ct≤30。
注意事項
分區(qū)操作（試劑配制、樣本處理、擴(kuò)增區(qū)），避免污染。
使用濾芯吸頭及無核酸酶耗材。
反應(yīng)液避光保存，避免氣泡干擾。
實驗后需用10%次氯酸或75%酒精清潔工作臺。
性能指標(biāo)
靈敏度：100拷貝/反應(yīng)。
特異性：與常見病原體無交叉反應(yīng)。
精密度：批內(nèi)/批間CV≤3%。
局限性
檢測結(jié)果受樣本質(zhì)量、提取方法及操作規(guī)范影響。
基因變異可能導(dǎo)致假陰性。
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關(guān)鍵字： 鼠附紅細(xì)胞體（鼠嗜血支原體）;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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