犬支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 犬支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Mycoplasma canis Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5256 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)開發(fā)，用于特異性檢測犬支原體（Mycoplasma canis）的核酸，適用于科研用途。試劑盒包含優(yōu)化的引物、探針及預(yù)混反應(yīng)體系，可實(shí)現(xiàn)高靈敏度、高特異性的定量或定性分析。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高特異性：引物及探針經(jīng)生物信息學(xué)篩選，靶向犬支原體保守基因序列，特異性達(dá)100%，避免交叉反應(yīng)。
靈敏度優(yōu)異：最低檢測限為103 cfu/mL，無需增菌即可直接檢測樣本。
重現(xiàn)性可靠：經(jīng)大量菌株驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
快速檢測：全程耗時3-4小時，適用于臨床樣本、環(huán)境樣本等。
雙重質(zhì)控：提供陽性對照，區(qū)分假陰性結(jié)果；陰性對照確保無污染。
線性范圍廣：定量檢測時線性范圍覆蓋5個數(shù)量級。
產(chǎn)品組成
主試劑：預(yù)混qPCR反應(yīng)液（含探針、引物、dNTPs、Taq酶等）
對照品：陽性對照（1×10? copies/μL）、陰性對照（DEPC-H?O）
輔助試劑：DNA提取建議兼容市售核酸提取試劑盒。
實(shí)驗(yàn)流程
樣本制備：
提取樣本DNA（組織、血液、細(xì)胞等），建議使用液氮或Trizol保存樣本。
避免提供直接DNA/RNA樣品，需溝通實(shí)驗(yàn)背景及基因信息。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（選做）：
將陽性對照按10倍梯度稀釋（10?~103 copies/μL），用于定量分析。
qPCR反應(yīng)體系配制：
每20 μL反應(yīng)體系含：預(yù)混液10 μL、模板DNA 2 μL、DEPC-H?O補(bǔ)足。
設(shè)置陰性對照（DEPC-H?O）和陽性對照（10? copies/μL）。
擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（40循環(huán)，熒光采集）。
結(jié)果判讀
定性分析：
陽性：Ct值<35，S型擴(kuò)增曲線；
陰性：Ct值>38或無Ct值；
可疑：Ct值35-38需復(fù)檢。
定量分析：
以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計(jì)算樣本拷貝數(shù)。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增需在不同區(qū)域進(jìn)行，避免污染。
試劑保存：-20℃避光保存，有效期1年；避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)防護(hù)：使用一次性耗材，實(shí)驗(yàn)后以75%酒精或紫外燈處理工作臺。
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關(guān)鍵字： 犬支原體;探針法;PCR鑒定試劑盒;
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