結腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

商品屬性

產品概述

本試劑盒采用探針法熒光定量PCR技術，專用于結腸彎曲桿菌（Campylobacter coli）核酸的快速、高靈敏度檢測。通過特異性引物和探針設計，結合實時熒光信號采集，實現(xiàn)對目標基因的定性和定量分析，適用于食品安全監(jiān)測、環(huán)境樣本篩查及科研領域。

檢測原理

探針法原理：

探針5'端標記熒光報告基團（如FAM），3'端標記淬滅基團。

PCR擴增時，Taq酶切割與靶序列結合的探針，釋放熒光信號，信號強度與擴增產物量成正比。

實時定量：通過監(jiān)測每個循環(huán)的熒光強度變化，生成擴增曲線和Ct值，計算初始模板濃度。

產品特點

高特異性：引物探針經生物信息學驗證，與空腸彎曲桿菌等近源菌無交叉反應（特異性≥99%）。

高靈敏度：最低檢測限達103–10? copies/mL（部分優(yōu)化體系可達100–500 copies/mL）。

快速高效：全程檢測時間1.5–2小時（含核酸提取），顯著優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)法（24–48小時）。

操作便捷：預混反應體系，兼容自動化提取設備，支持批量檢測。

試劑盒組成

| 組分 | 規(guī)格 | 功能說明 |

| 熒光PCR反應液（含緩沖液） | 500–950 μL | 提供dNTPs及反應緩沖環(huán)境 |

| 引物/探針混合物 | 100–200 μL | 靶向結腸彎曲桿菌保守基因區(qū)域 |

| 酶混合物（含DNA聚合酶） | 48–50 μL | 催化擴增反應 |

| 陽性質控品（人工DNA片段）| 50 μL（1×10? copies/μL） | 驗證實驗有效性 |

| 陰性質控品（無菌水） | 50 μL | 監(jiān)控污染及假陽性 |

| 使用說明書 | 1份 | 操作流程及質控標準 |

樣本要求

適用樣本類型：糞便、食品（肉類、乳制品）、環(huán)境拭子、臨床樣本（需符合生物安全規(guī)范）。

核酸提取建議：

推薦使用磁珠法或離心柱法提取DNA，確保純度。

粗提法：100℃加熱裂解10分鐘后離心取上清。

操作步驟

標準曲線制備（梯度稀釋陽性質控品至102–10? copies/μL）。

反應體系配置（20 μL體系）：

熒光PCR反應液：10 μL

酶混合物：2 μL

引物/探針混合液：2 μL

模板DNA：5 μL

擴增程序：

預變性：95℃ 10分鐘

循環(huán)擴增（40–45循環(huán)）：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集FAM通道信號）。

結果判讀

定性分析：

陽性：Ct值≤38且擴增曲線呈S型。

陰性：無Ct值或Ct值>40。

定量分析：通過標準曲線計算樣本初始拷貝數(shù)。

注意事項

生物安全：

僅限科研或獸醫(yī)診斷使用，不可用于臨床。

操作需在BSL-2實驗室進行。

防污染措施：

嚴格分區(qū)操作（試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)）。

使用帶濾芯槍頭，避免交叉污染。

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融（≤7次），有效期12個月。

免責聲明

本產品僅用于科學研究，不適用于臨床診斷或治療。用戶需確保操作符合當?shù)胤ㄒ?guī)及實驗室安全標準。

公司正在出售的產品