柑橘黃龍病菌亞洲種探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 柑橘黃龍病菌亞洲種探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Candidatus Liberibacter asiaticus Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5265 |
預期用途
本試劑盒基于TaqMan探針法實時熒光PCR技術，用于柑橘黃龍病菌亞洲種（Candidatus Liberibacter asiaticus）核酸的定性及定量檢測。該病原體可導致柑橘黃龍病，表現(xiàn)為葉片黃化、斑駁、枝梢衰弱及果實畸形等癥狀。本產(chǎn)品適用于科研用途，不用于臨床診斷。
規(guī)格與成分
探針法qRT-PCR緩沖液：500μL
探針法qRT-PCR酶混合液：100μL
熒光PCR專用模板稀釋液：1 mL
特異性引物混合液：100μL（針對柑橘黃龍病菌亞洲種保守基因區(qū)域設計）
qRT-PCR探針：50μL（FAM通道標記）
陽性對照：50μL（1×10^8拷貝/μL，無傳染性DNA片段）
說明書：1份
儲存條件
-20℃避光保存，有效期12個月。避免反復凍融（建議凍融次數(shù)少于7次）。
適用儀器
兼容ABI、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad等主流熒光定量PCR儀。
自備材料
無核酸酶的離心管、吸頭及PCR反應管
RNA提取試劑（推薦柱式病毒RNA提取試劑盒）
離心機、渦旋振蕩器
使用方法
1. 標準曲線制備
將陽性對照進行10倍梯度稀釋（10^2–10^7拷貝/μL），標記為2–7號管，冰上保存?zhèn)溆谩?/span>
2. 樣本處理
提取待測樣本RNA，建議設置陰性對照（NC，水）和陽性對照（PC，稀釋后的陽性對照）。
3. PCR反應體系（20μL）
| 成分 | 樣本管（μL） | 陰性對照（μL） | 標準曲線管（μL） |
| qRT-PCR緩沖液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 探針 | 1 | 1 | 1 |
| 引物混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 樣本RNA/標準品/水 | 5 | 5（水） | 5（標準品） |
4. 擴增程序
逆轉錄：50℃ 30分鐘
預變性：94℃ 10分鐘
PCR循環(huán)（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM信號）
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標準曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣本濃度。
定性檢測：陰性對照Ct值≥40時，樣本Ct值≤35判為陽性。
注意事項
操作需分區(qū)進行（試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)），避免交叉污染。
陽性對照需最后添加，防止氣溶膠污染。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷或治療。
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關鍵字： 柑橘黃龍病菌亞洲種;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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