胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 胡桃源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Juglandaceae-derived Component Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR5305 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒采用探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于檢測(cè)胡桃源性成分，適用于科研用途（不可用于臨床）。試劑盒包含50次20μL體系的反應(yīng)組分，可進(jìn)行高特異性、高靈敏度的核酸定量或定性分析。
規(guī)格及組分
| 編號(hào) | 成分 | 規(guī)格 |
| 試劑一 | 探針法qRT-PCR緩沖液 | 500μL |
| 試劑二 | 探針法qRT-PCR酶混合液 | 100μL |
| 試劑三 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL |
| 試劑四 | 胡桃源性成分引物混合液 | 100μL |
| 試劑五 | 胡桃源性成分qRT-PCR探針 | 50μL |
| 試劑六 | 陽(yáng)性對(duì)照（1×10?拷貝/μL） | 50μL |
| - | 說(shuō)明書 | 1份 |
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融。
自備試劑與儀器
樣品RNA提取試劑（兼容柱式病毒RNA提取試劑盒）。
熒光定量PCR儀、離心機(jī)、冰盒、移液器（20μL-1000μL）及帶芯槍頭。
實(shí)驗(yàn)操作流程
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（6個(gè)梯度稀釋）
標(biāo)記離心管（7-2號(hào)），每管加45μL模板稀釋液。
7號(hào)管加入5μL陽(yáng)性對(duì)照（1×10?拷貝/μL），震蕩混勻得1×10?拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品，依次稀釋至102拷貝/μL（2號(hào)管）。
2. 樣品RNA制備
建議設(shè)置N+2個(gè)樣本（含陽(yáng)性/陰性對(duì)照），使用超純水作為陰性對(duì)照。
提取RNA后需驗(yàn)證純度（A260/A280比值1.8-2.0）。
3. PCR反應(yīng)體系（20μL/管）
| 成分 | 樣品管（N+2） | 陰性對(duì)照 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線管 |
| qRT-PCR緩沖液 | 10μL | 10μL | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 探針 | 1μL | 1μL | 1μL |
| 引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 樣品RNA/標(biāo)準(zhǔn)品/水 | 5μL | 5μL水 | 5μL標(biāo)準(zhǔn)品 |
4. PCR程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 30分鐘
預(yù)變性：94℃ 10分鐘
40循環(huán)：94℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM信號(hào)）
數(shù)據(jù)分析
定量檢測(cè)：以標(biāo)準(zhǔn)品log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制曲線，計(jì)算樣本濃度。
定性檢測(cè)：陰性對(duì)照Ct≥40，陽(yáng)性對(duì)照Ct≤35方為有效。
注意事項(xiàng)
操作需在獨(dú)立潔凈區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
移液誤差需≤2%，建議使用校準(zhǔn)移液器。
試劑使用前需平衡至室溫，避光操作。
推薦雙孔復(fù)檢以確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
免責(zé)聲明
本產(chǎn)品僅限科研使用，不適用于臨床診斷。實(shí)驗(yàn)需遵守相關(guān)生物安全規(guī)范。
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關(guān)鍵字： 胡桃源性成分;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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