榛子源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒

商品屬性

產(chǎn)品概述

本試劑盒用于檢測樣品中榛子源性成分，基于探針法熒光定量PCR技術(shù)，具有高靈敏度和特異性，適用于科研領(lǐng)域的定性與定量分析。試劑盒包含預(yù)混緩沖液、酶混合液、引物-探針干粉及陽性對照，操作便捷，兼容常規(guī)DNA提取方法。

包裝規(guī)格

| 成分 | 規(guī)格 |

| 探針法qPCR緩沖液 | 500 μL |

| 探針法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL |

| PCR引物-探針干粉 | 50次反應(yīng) |

| PCR陽性對照（10^7拷貝/μL）| 50 μL |

操作流程

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（10^1–10^6拷貝/μL）

注意事項(xiàng)：稀釋需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。

步驟：

標(biāo)記6管，分別加入45 μL稀釋液。

依次梯度稀釋陽性對照（5 μL至下一管），震蕩混勻，冰上保存。

2. 樣品DNA制備

建議設(shè)置N+2個(gè)樣本（含陰/陽性對照），使用兼容的DNA提取方法。

3. qPCR反應(yīng)體系（20 μL）

| 成分 | 樣品管 | 陰性對照 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線管 |

| qPCR緩沖液 | 10 μL | 10 μL | 10 μL |

| 酶混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 引物-探針混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 待測DNA模板 | 5 μL | — | — |

| 標(biāo)準(zhǔn)曲線稀釋液 | — | — | 5 μL |

| 超純水 | — | 5 μL | — |

4. 擴(kuò)增程序

逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 30 min（如需）。

預(yù)變性：94℃ 10 min。

40循環(huán)：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信號）。

數(shù)據(jù)分析

定量檢測：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸計(jì)算樣品濃度。

定性檢測：Ct≤39為陽性，≥40為陰性；臨界值需復(fù)測。

注意事項(xiàng)

分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、加樣），避免污染。

使用帶芯槍頭，反應(yīng)液避光保存。

實(shí)驗(yàn)后消毒臺面（10%次氯酸或75%酒精）。

所有組分需-20℃保存，有效期12個(gè)月。

局限性

結(jié)果受樣本采集、提取方法及運(yùn)輸條件影響。

基因突變或試劑保存不當(dāng)可能導(dǎo)致假陰性/陽性。

公司正在出售的產(chǎn)品