熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Bear-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5331 |
預期用途
用于檢測鮑魚等樣本中熊源性成分的DNA，適用于科研實驗，不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供待測樣本DNA/RNA即可進行檢測。
高特異性：引物及探針基于熊源性成分保守序列設計，無交叉反應。
高靈敏度：可檢測低至幾百拷貝/反應的靶標DNA。
操作簡便：一管式熒光定量PCR，減少污染風險。
對照齊全：含陽性對照（1×10^8拷貝/μL）及陰性對照，便于結(jié)果判讀。
試劑盒組成
上研生版本：
熒光PCR緩沖液、酶混合液、模板稀釋液
引物混合液、探針、陽性對照
生物版本：
探針法qRT-PCR緩沖液、酶混合液、引物探針混合液
陽性對照（無傳染性DNA片段）
使用方法
1. 標準曲線制備（以10^2~10^7拷貝/μL為例）
稀釋步驟：
標記7管（1~7號），1號管加90μL稀釋液，其余加45μL。
從陽性對照（10^8拷貝/μL）取10μL加入1號管，依次10倍稀釋至6號管，7號管為陰性對照。
注意事項：
使用獨立操作區(qū)及帶濾芯吸頭，避免交叉污染。
稀釋后分裝保存于-20℃，避免反復凍融。
2. 樣本DNA/RNA制備
推薦使用配套裂解液或兼容的核酸提取試劑盒，確保純度滿足PCR要求。
3. PCR反應體系（20μL）
| 成分 | 樣品管 | 陰性對照 | 標準曲線管 |
| PCR緩沖液 | 10μL | 10μL | 10μL |
| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |
| 探針/引物混合液 | 1-2μL | 1-2μL | 1-2μL |
| 模板 | 5μL | - | - |
| 標準曲線稀釋液 | - | - | 5μL |
| 超純水 | - | 5μL | - |
4. 反應程序
逆轉(zhuǎn)錄（若適用）：50℃ 30分鐘
預變性：94℃ 10分鐘
擴增（40循環(huán)）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集FAM通道信號）
結(jié)果分析
標準曲線：以陽性對照拷貝數(shù)對數(shù)與Ct值繪制，要求R2≥0.98。
判讀標準：
陽性：Ct值<30；
可疑：30≤Ct≤35，需復測；
陰性：Ct值≥35或無信號。
注意事項
操作環(huán)境：需在潔凈區(qū)域進行，使用濾芯吸頭。
保存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
應用限制：僅限科研使用，不可用于臨床或診斷目的。
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關(guān)鍵字： 熊源性成分;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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