豚鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 豚鼠源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Guinea Pig-derived Component Probe-based Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR5337 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術，專用于檢測豚鼠源性成分，具有高靈敏度和特異性。適用于科研領域，不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品特點
高靈敏度與特異性：引物及探針針對豚鼠源性成分保守區(qū)域設計，避免與其他微生物DNA/RNA交叉反應。
雙重檢測功能：支持定性與定量分析，定量線性范圍達5個數(shù)量級（10^1–10^6拷貝/μL）。
即開即用：預混緩沖液、酶混合液及優(yōu)化引物-探針組合，用戶僅需提供樣品模板。
內控設計：含陽性對照（無傳染性DNA片段），便于區(qū)分假陰性結果。
穩(wěn)定保存：-20℃保存，保質期12個月。
包裝規(guī)格
| 編號 | 成分 | 規(guī)格 |
| 試劑一 | 探針法qPCR緩沖液 | 500μL |
| 試劑二 | 探針法qPCR酶混合液 | 50μL/100μL* |
| 試劑三 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1mL |
| 試劑四 | PCR引物-探針干粉/混合液 | 50T/100μL* |
| 試劑五 | 陽性對照（10^7–10^8拷貝/μL） | 50μL |
操作流程
1. 標準曲線制備（以10倍梯度稀釋為例）
標記6管（7–2號），每管加45μL稀釋液。
7號管加入5μL陽性對照（10^8拷貝/μL），震蕩混勻得10^7拷貝/μL標準品，依次稀釋至10^2拷貝/μL。
2. 樣品DNA/RNA提取
建議設置N+2樣本（含陽性/陰性對照），使用兼容的提取試劑盒純化模板。
3. qPCR反應體系（20μL）
| 成分 | 樣品管（μL） | 陰性對照（μL） | 標準曲線管（μL） |
| qPCR緩沖液 | 10 | 10 | 10 |
| 酶混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 引物-探針混合液 | 2 | 2 | 2 |
| 模板（樣品/標準品） | 5 | — | 5（對應梯度） |
| 超純水 | — | 5 | — |
4. 反應程序
逆轉錄：50℃ 30 min（RNA模板需此步驟）。
預變性：94℃ 10 min。
40循環(huán)：94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信號）。
數(shù)據(jù)分析
定量：以標準品log拷貝數(shù)為橫軸、Ct值為縱軸繪制曲線，計算樣品濃度。
定性：Ct≤39為陽性，≥40為陰性；39–40間需復測。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)域進行，避免交叉污染。
質量控制：每次實驗需包含陰/陽性對照。
保存條件：試劑避光保存，反應液避免氣泡。
生物安全：實驗廢棄物按《微生物實驗室生物安全通則》處理。
局限性
結果受樣本質量、提取效率及運輸條件影響。
基因突變可能導致假陰性；污染風險可致假陽性。
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關鍵字： 豚鼠源性成分;探針法熒光定量;PCR試劑盒;
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