熒光素酶標(biāo)記的人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;A172-Luc
產(chǎn)品信息：

1. 細(xì)胞基本檔案

特征維度  詳細(xì)信息

親本來源  人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 (A172)

修飾方式  慢病毒轉(zhuǎn)染攜帶 Luc 基因

標(biāo)記物  穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶

抗性篩選  通常攜帶嘌呤霉素 (Puromycin) 或博來霉素 (BSD) 抗性

種屬/性別  人 (男性，53歲)

組織來源  腦組織（膠質(zhì)母細(xì)胞瘤）

核心特性與應(yīng)用

為什么要選擇A172-Luc？

活體成像（IVIS）： 這是它最大的用途。你可以通過活體成像系統(tǒng)，在不處死小鼠的情況下，連續(xù)觀察膠質(zhì)瘤在小鼠腦部的生長(zhǎng)情況、藥物對(duì)腫瘤的穿透效果以及腫瘤的復(fù)發(fā)情況。

藥物篩選與療效評(píng)估： 利用發(fā)光強(qiáng)度定量腫瘤細(xì)胞數(shù)量，快速評(píng)估化療藥物（如替莫唑胺）或靶向藥物對(duì)膠質(zhì)瘤的抑制效果。

侵襲與遷移研究： A172細(xì)胞本身具有較強(qiáng)的侵襲性，Luc標(biāo)記后仍保留此特性，適合研究膠質(zhì)瘤的浸潤(rùn)機(jī)制。

培養(yǎng)操作手冊(cè)

基礎(chǔ)培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基： DMEM (高糖) 基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

血清： 10% 胎牛血清 (FBS)。

添加劑： 1% 青霉素-鏈霉素 (P/S)。

環(huán)境： 37℃，5% CO，飽和濕度培養(yǎng)箱。

傳代操作 (關(guān)鍵步驟)

A172細(xì)胞貼壁相對(duì)較牢，消化時(shí)間需要控制好。

觀察： 細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90% 時(shí)進(jìn)行傳代。

清洗： 棄去舊培養(yǎng)基，用不含鈣鎂的 PBS 輕輕潤(rùn)洗一次。

消化： 加入適量的 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA)，放入培養(yǎng)箱消化 1-2 分鐘。

注意： 請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓、間隙變大時(shí)即可。

終止： 加入含血清的完全培養(yǎng)基終止消化（血清中的蛋白酶抑制劑會(huì)停止消化反應(yīng)）。

吹打： 輕柔吹打使細(xì)胞完全脫落并分散均勻。

離心： 1000 rpm 離心 3-5 分鐘，棄上清。

重懸： 加入新鮮完全培養(yǎng)基，按 1:2 至 1:3 的比例傳代到新瓶中。

凍存與復(fù)蘇

凍存液： 90% 血清 + 10% DMSO（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

程序： 使用程序凍存盒（或 4℃ 30min -> -20℃ 2h -> -80℃ 過夜 -> 液氮），第二天轉(zhuǎn)入液氮保存。

復(fù)蘇： 快融。37℃水浴中迅速搖動(dòng)，1-2分鐘內(nèi)融化，離心去除凍存液后重懸接種。

A172-Luc 特有注意事項(xiàng)

抗生素維持（重要）：

普通的A172細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)通常不需要添加抗生素來維持生長(zhǎng)。

但是，A172-Luc 是經(jīng)過抗性篩選（通常是嘌呤霉素 Puromycin）構(gòu)建的。為了防止長(zhǎng)期培養(yǎng)后熒光素酶基因丟失（即發(fā)光能力減弱或消失），建議在培養(yǎng)基中定期添加低濃度的嘌呤霉素進(jìn)行維持（具體濃度需參考你購(gòu)買細(xì)胞時(shí)的說明書，通常在 0.5-1.0 μg/mL 左右）。

致瘤性爭(zhēng)議：

有資料顯示A172細(xì)胞在免疫缺陷小鼠中成瘤性較差（或不致瘤），但在實(shí)際科研應(yīng)用中，通過提高接種量或使用Matrigel混合接種，它仍被廣泛用于膠質(zhì)瘤模型構(gòu)建。如果你計(jì)劃進(jìn)行裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)，建議先查閱相關(guān)文獻(xiàn)確認(rèn)接種方案。

STR鑒定：

收到細(xì)胞或凍存前，建議進(jìn)行 STR 鑒定，確保細(xì)胞系沒有發(fā)生交叉污染，且與 ATCC 數(shù)據(jù)庫(kù)匹配度在 80% 以上。

總結(jié)

A172-Luc = A172 (膠質(zhì)瘤模型) + Luc (活體可視化)。

它結(jié)合了A172細(xì)胞遺傳背景穩(wěn)定和Luc細(xì)胞可視化的優(yōu)勢(shì)，是研究膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)、侵襲及藥效評(píng)價(jià)的強(qiáng)有力工具。特別提醒你注意定期添加嘌呤霉素以維持熒光標(biāo)記的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Anti-RACK1 受體激活蛋白激酶C1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	IL-2(Human Interleukin 2) ELISA kit 人白介素2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-STAT3(pThr705)/FITC 熒光素標(biāo)記抗0酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-GM-CSFR Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	TNF-alpha 英文名稱： 壞死因子-α抗體 0.1ml
Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標(biāo)記抗嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Anti-ZNF474/ZFP106 鋅指蛋白474抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ghrelin/Obestatin 腦腸肽抗體 規(guī)格 0.1ml	Anti-IGF1R/CD221 胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-Phospho-PKR (Thr451) 0酸化蛋白激酶R抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml	Rhesus antibody Rh CCDC40 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-F1 operon positive regulatory protein(CT) 肺耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(C端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh Transglutaminase 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
RASGEF1A 英文名稱： 鳥嘌呤核苷酸交換因子rasgef1a抗體 0.2ml	S100A18 英文名稱： 角化蛋白S100A18抗體 0.2ml
Anti-TNFRSF18/FITC 熒光素標(biāo)記糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)壞死因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml	熒光素酶標(biāo)記的人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;A172-LucAvidin/FITC 熒光素標(biāo)記親合素 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml	Rhesus antibody Rh PEG3 PEG3蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

注意事項(xiàng)與應(yīng)用

無菌操作：必須嚴(yán)格無菌無毒，避免微生物污染和不同細(xì)胞間交叉污染。

營(yíng)養(yǎng)需求：需提供氨基酸、維生素、無機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子等，動(dòng)物細(xì)胞還需血清。

抗生素使用：可添加雙抗或三抗預(yù)防污染，但長(zhǎng)期培養(yǎng)不建議持續(xù)使用，以防產(chǎn)生耐藥性。

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)研究的基礎(chǔ)工具，可用于細(xì)胞生理代謝、藥物篩選、疫苗生產(chǎn)等研究。不同細(xì)胞系的具體培養(yǎng)條件需參考相關(guān)文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)經(jīng)驗(yàn)調(diào)整。