脫氫酶(DHA)測定試劑盒/分光光度法/48樣
測定意義:
脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統(tǒng)被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。
測定原理:
在細胞呼吸過程中,氫受體 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF 呈現紅色,在波長 485nm 處有最大吸收峰,采用分光光度法于 485nm 測定其吸光值,即得脫氫酶活性。
自備儀器和用品:
篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。測定步驟和操作表:
空白管
測定管
樣品(μL)
150
蒸餾水(μL)
試劑一 (μ L)
試劑二(μL)
充分混勻,37℃培養(yǎng) 24h
試劑三(μL)
1350
振蕩 1h ,8000g ,25℃ , 離心 5min ,取 1mL 上清于比色皿,測定 A485,△A=A 測定-A 空白管??瞻坠苤?/span>
要做一管。
注 意:
正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
上海酶聯生物科技有限公司
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