檢驗原理:
基于SYBR Green染料法熒光定量PCR技術(shù)，利用一對特異性引物擴增人皰疹病毒保守基因序列。SYBR Green染料可非特異性結(jié)合雙鏈DNA，在PCR擴增過程中熒光信號隨產(chǎn)物積累而增強，通過實時監(jiān)測熒光強度變化實現(xiàn)病毒DNA的定性檢測。
產(chǎn)品名稱
| 人皰疹病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Human Herpesvirus Universal SYBR qPCR Kit |
| 產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
| 檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR2645 |
試劑組成:
2×qPCR Master Mix：預(yù)混的SYBR Green染料、dNTPs、緩沖液（500μL×1管）
熒光PCR專用模板稀釋液（1mL×1管）
人皰疹病毒通用引物混合物（100μL×1管）
陽性質(zhì)控品（50μL×1管，含病毒DNA片段）
陰性質(zhì)控品（250μL×1管，無模板對照）
使用說明書（1份）
實驗步驟:
1. 樣本核酸提?。颖咎幚韰^(qū)）
取100μL樣本，使用離心柱法核酸提取試劑盒純化DNA，洗脫體積50μL。
2. 試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
根據(jù)樣本數(shù)（N=樣本數(shù)+1陰性質(zhì)控+1陽性質(zhì)控）配制反應(yīng)體系，每管20μL：
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2×qPCR Master Mix 10μL
引物混合物 1μL
模板DNA 5μL
RNase-free水 4μL
3. PCR擴增（擴增區(qū)）
?程序設(shè)置?（以ABI 7500為例）：
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95℃ 3分鐘（預(yù)變性）
95℃ 10秒 → 60℃ 1分鐘（40循環(huán)，采集熒光信號）
4. 結(jié)果分析
?基線設(shè)定?：循環(huán)6-15；?閾值?：超過陰性質(zhì)控曲線峰值。
?判讀標(biāo)準(zhǔn)?：
陰性質(zhì)控：Ct值≥40或無擴增曲線。
陽性質(zhì)控：Ct值≤35且有S形擴增曲線。
樣本：Ct值≤35且擴增曲線呈指數(shù)增長判為陽性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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關(guān)鍵字： 人皰疹病毒通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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