細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)測(cè)定試劑盒/分光光度法/24樣
測(cè)定意義:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase ,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH ,Ivr 分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。
AI 的最適 pH 為 3~5 。AI 分為可溶性 AI(S-AI)和細(xì)胞壁不溶性 AI(B-AI)兩種類型。B-AI 存在于細(xì)胞間隙并結(jié)合在細(xì)胞壁上,主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時(shí)蔗糖的分解,以維持庫(kù)源之間蔗糖的濃度。
測(cè)定原理:
B-AI 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與 3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范圍內(nèi) 510nm 光吸收增加速率與 B-AI 活性成正比。
需自備的的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。測(cè)定步驟和加樣表:
試劑名稱(μL)
測(cè)定管
對(duì)照管
樣本
200
試劑一
800
試劑二
混勻, 37℃準(zhǔn)確水浴 30min 后,95℃水浴 10min(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)
試劑三
500
混勻,95℃水浴 10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻, 510nm 處,蒸餾水調(diào)零,記錄各管吸光值 A ,如果吸光值大于 2 ,可以用蒸餾水稀釋后測(cè)定(計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)) ,ΔA=A 測(cè)定-A 對(duì)照。
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司
聯(lián)系商家時(shí)請(qǐng)?zhí)峒癱hemicalbook,有助于交易順利完成!