果糖-6-磷酸果糖激酶(PFK)測定試劑盒/微量法/96樣
測定意義：
PFK（EC 2.7.1.11 ）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，負責將果糖-6-磷酸和 ATP 轉化為果糖-1,6 二磷酸和 ADP，是糖酵解過程的關鍵調節(jié)酶之一。
測定原理：
PFK 催化果糖-6-磷酸和 ATP 生成果糖-1,6-二磷酸和 ADP ，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進一步依次催化NADH 氧化生成 NAD+ ，在 340nm 下測定 NADH 下降速率，即可反映 PFK 活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。
測定步驟：
1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 340nm，蒸餾水調零。
2、 樣本測定
（1）在試劑二瓶中加入 17mL 試劑一和 1.13mL 蒸餾水充分溶解，置于 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 5min；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；
（2）在試劑三中加入 1mL 蒸餾水充分混勻，冰上放置備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；
（3）在試劑四中加入 1mL 蒸餾水充分混勻，冰上放置待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融；
（4）在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、10μL 試劑三、10μL 試劑四和 170μL 試劑二，混勻，立即記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 10min20s 后的吸光值 A2 ，計算 ΔA=A1-A2。
注 意：
不同勻漿組織中 PFK 活力不一樣，做正式試驗之前請做 1-2 只預試，若 ΔA>0.5，則說明活力太高，必須用提取液稀釋成適當濃度勻漿上清液（計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)），或縮短反應時間至 2min 或5min,使 ΔA<0.5，以提高檢測靈敏度。
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