C-a-spase-9活性測定試劑盒比色法/100T
中文名稱 ：Caspase-9 活性檢測試劑盒
英文名稱 ：Caspase-9Activity Assay Kit
儲存條件 ： -20℃
產(chǎn)品包裝 ：盒裝
檢測方法 ：比色法 Colori metric
有 效 期 ：6 個月
產(chǎn)品規(guī)格 ：20T 、 50T 、 100T
試劑盒的組成和配制：
試劑名稱/規(guī)格 | 20T | 50T | 100T | 保存條件 |
試劑一 | 液體 20mL×1 瓶 | 液體20 mL1瓶 | 液體 25 mL × 1瓶 | -20℃保存 |
試劑二 | 液體30mL×1 瓶 | 液體60 mL×1瓶 | 液體 120mL× 1瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體 0.25L × 1 支 | 液體0.55mLx支 | 液體 0.55mL ×2支 | -20℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體1mL × 1 支 | 液體1 mLx1支 | 液體1 mL× 1支 | -20℃保存 |
產(chǎn)品簡介：
Caspase 是參與細(xì)胞凋亡過程的蛋白酶家族 ， 包含10多個成員 。 Caspase-9也稱ICE-LAP6或Mch6，可與細(xì)胞色素 c 和Apaf1 形成復(fù)合物被激活，并進(jìn)一步激 活細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵酶 caspase-3 ，從而觸發(fā)凋亡級聯(lián)反 應(yīng)。 Caspase-9 是凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中重要 的上游 caspase ，其激活可以通過磷酸化進(jìn)行調(diào)控。
本 試 劑 盒 測 定 原 理 基 于 Caspase-9 特 異 水 解 多 肽 底 物 LEHD-pNA (Leu-Glu-His-Asp-p-nitroanilide) ，釋放的游離硝基苯胺 pNA 在 405 nm 有大吸收峰。采用可見光光度比色法測定 pNA 而得到 Caspase 活性。適用于檢 測哺乳動物組織、細(xì)胞 Caspase-9 活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、 100μL 玻璃比色皿/96 孔板、 臺式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、研 缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量）：
1、培養(yǎng)細(xì)胞： 先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（約 106 個） 加 100 μL 試劑二（若裂 解不充分可提高至 150-200 μL），震蕩重懸沉淀 ， 置冰上靜置 15 min， 4℃ , 15000g 離心 10- 15min ，取上清置冰上 待測。
2、組織： 按照組織質(zhì)量（g）：試劑二體積（ mL）為 1： 5~10 的比例（建議稱取約 0.1 g 組織，加入 1 mL 試 劑二），冰浴研磨或充分剪碎，置冰上靜置 15 min ，4℃ , 15000g離心 10- 15min ，取上清置冰上待測。
測定步驟：
1可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上 ，調(diào)節(jié)波長至 405nm ，蒸餾水調(diào)零。
2臨用前用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液將 5 mmol/L pNA 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至 200 、 100 、 50 、 25 、 12.5 、0 μmol/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液待用。
注 意：
實驗之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測。
關(guān)鍵字： Caspase-9試劑盒 ; Caspase-9ELISA KIT ; Caspase-9ELISA試劑盒 ;
上海酶聯(lián)生物科技有限公司，成立之初，獲得國內(nèi)外酶聯(lián)免疫同行的大力支持，公司為了感恩于同行無私的幫助，特取意酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA試劑盒）的“酶聯(lián)”兩字，時刻銘記回報社會，公司已制定十年內(nèi)，將公司打造成國內(nèi)酶聯(lián)免疫試劑盒（ELISA試劑盒）行業(yè)超級航母，并且，這么多年，我們一直是為了這個愿景，堅定不移的努力奮斗著。