產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：采用SYBR Green染料法，可檢測低至10拷貝/μL的病毒核酸。
特異性強(qiáng)：引物針對(duì)SFV基因組高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，避免與其他病原體交叉反應(yīng)。
操作簡便：即開即用，兼容常規(guī)核酸提取試劑盒，用戶僅需提供模板RNA/DNA。
雙重功能：支持定性與定量分析，定量線性范圍達(dá)5個(gè)數(shù)量級(jí)（10^1~10^6拷貝/μL）。
質(zhì)控完善：含陽性對(duì)照（標(biāo)準(zhǔn)品）與無模板對(duì)照（NTC），有效排除假陰性/假陽性。
產(chǎn)品名稱 | 猴泡沫病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Simian Foamy Virus RT-qPCR Kit (Dye Method) |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR2713 |
實(shí)驗(yàn)流程
1. 樣本制備
使用商品化RNA提取試劑盒（如Trizol法）從血液、組織或細(xì)胞培養(yǎng)物中提取病毒RNA，建議DNase處理以去除基因組DNA污染。
2. 試劑配制（樣本制備區(qū)）
解凍試劑組分（預(yù)混酶、引物、緩沖液等），離心后按比例混合（具體體積參考廠商手冊）。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：將陽性對(duì)照梯度稀釋（建議5-6個(gè)濃度點(diǎn)），用于定量分析。
3. PCR擴(kuò)增（擴(kuò)增區(qū)）
反應(yīng)程序：
逆轉(zhuǎn)錄（50℃ 15-30分鐘）→ 預(yù)變性（95℃ 2分鐘）→ 循環(huán)階段（95℃ 15秒，60℃ 30-60秒，40循環(huán)）。
熒光信號(hào)采集：建議在延伸步驟結(jié)束時(shí)讀取SYBR Green信號(hào)（FAM通道）。
4. 數(shù)據(jù)分析
閾值（Threshold）設(shè)定：以3-15循環(huán)的熒光信號(hào)標(biāo)準(zhǔn)差10倍為基線。
定量計(jì)算：通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合CT值，計(jì)算樣本病毒載量。
技術(shù)參數(shù)
反應(yīng)體系：20μL/反應(yīng)，50次檢測規(guī)格
應(yīng)用范圍：科研用途（非臨床診斷），兼容定性與定量檢測
標(biāo)準(zhǔn)品制備（示例：6點(diǎn)梯度稀釋）
標(biāo)記離心管（編號(hào)7至2對(duì)應(yīng)10?-102拷貝/μL梯度）
使用帶濾芯槍頭操作，每管加入45μL專用稀釋液
梯度稀釋應(yīng)在獨(dú)立潔凈區(qū)完成，避免氣溶膠污染
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：嚴(yán)格區(qū)分樣本制備區(qū)、試劑配制區(qū)和擴(kuò)增區(qū)，避免氣溶膠污染。
質(zhì)量控制：每批次實(shí)驗(yàn)需包含陰性對(duì)照（NTC）以監(jiān)測污染，陽性對(duì)照驗(yàn)證試劑活性。
適用范圍：僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 猴泡沫病毒;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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