草莓黃單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 草莓黃單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Xanthomonas fragariae Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR2657 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，專用于檢測草莓黃單胞菌（Xanthomonas fragariae），具有高靈敏度和特異性。適用于科研用途，支持定性和定量分析，定量線性范圍達(dá)5個數(shù)量級，檢測靈敏度為100拷貝/反應(yīng)。
產(chǎn)品規(guī)格
規(guī)格：50次/盒（20μL體系）
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月；低溫運輸。
適用儀器：ABI、安捷倫MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等熒光定量PCR儀。
試劑盒組分
預(yù)混PCR反應(yīng)液（含優(yōu)化引物、染料等）
陽性對照（1×10^8拷貝/μL）
DEPC-H?O（無核酸酶水）
注：需自備樣品DNA及核酸提取試劑。
實驗流程
1. DNA提取
使用兼容的核酸提取試劑盒制備樣本DNA，建議在樣本制備區(qū)操作。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測需執(zhí)行）
標(biāo)記6管（7~2號），依次加入45 μL DEPC-H?O。
梯度稀釋陽性對照：
7號管：5 μL陽性對照（1×10^8拷貝/μL）→ 1×10^7拷貝/μL。
6號管：取5 μL 7號管溶液→ 1×10^6拷貝/μL。
重復(fù)稀釋至2號管，獲得1×10^2~1×10^7拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
每次稀釋需更換帶濾芯槍頭，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制
按20μL體系混合：
10μL預(yù)混PCR反應(yīng)液
2μL模板DNA（樣本或標(biāo)準(zhǔn)品）
8μL DEPC-H?O
短暫離心后上機(jī)檢測。
注意事項
分區(qū)操作：樣本制備、試劑配制、擴(kuò)增需嚴(yán)格分區(qū)，避免污染。
質(zhì)量控制：每批次實驗需包含陰性對照（DEPC-H?O）和陽性對照。
假陰性判斷：若陽性對照未檢出，需排查操作或試劑問題。
結(jié)果分析
定性：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈S型判為陽性。
定量：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本拷貝數(shù)。
聲明
本產(chǎn)品僅限科研使用，不適用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 草莓黃單胞菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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