檢驗(yàn)原理
本試劑盒基于TaqMan探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)H7N4亞型病毒基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物及探針。通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄（RT）與PCR擴(kuò)增的同步進(jìn)行，實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒RNA的定性及定量檢測(cè)。擴(kuò)增過(guò)程中釋放的熒光信號(hào)由儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)分析樣本中的病毒載量。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 甲型流感（禽流感）病毒H7N4亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Avian Influenza A Virus Subtype H7N4 Dye-based Quantitative Real-time RT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類(lèi) | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類(lèi)型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR2720 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高特異性：引物及探針針對(duì)H7N4亞型獨(dú)特基因序列設(shè)計(jì)，避免與其他流感亞型交叉反應(yīng)。
高靈敏度：檢測(cè)下限可達(dá)1000拷貝/反應(yīng)。
一體化操作：采用一管式RT-PCR技術(shù)，逆轉(zhuǎn)錄與擴(kuò)增在同一反應(yīng)管內(nèi)完成，減少污染風(fēng)險(xiǎn)。
便捷性：預(yù)混試劑包含緩沖液、酶、引物及對(duì)照，用戶(hù)僅需添加模板RNA即可。
適用范圍：僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
試劑組成
試劑一：5×雙酶一管式RT-PCR Buffer（200 μL，橘黃蓋）
試劑二：MMLV-Taq Mix（75 μL，紅蓋）
試劑三：超純水（1 mL，亮黃蓋）
試劑四：H7N4亞型RT-PCR引物混合液（含探針）
陽(yáng)性對(duì)照：H7N4病毒RNA標(biāo)準(zhǔn)品
陰性對(duì)照：無(wú)核酸酶水
結(jié)果判定
有效性驗(yàn)證：
陽(yáng)性對(duì)照Ct值需在預(yù)期范圍內(nèi)，且溶解曲線(xiàn)Tm值符合標(biāo)準(zhǔn)。
陰性對(duì)照無(wú)Ct值或Tm值異常，否則實(shí)驗(yàn)無(wú)效需排查污染。
定性分析：
樣本Ct值≤閾值且Tm值與陽(yáng)性對(duì)照一致，判為陽(yáng)性；無(wú)Ct值則為陰性。
定量分析：
通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（Ct值與log濃度線(xiàn)性關(guān)系）計(jì)算樣本病毒載量。
注意事項(xiàng)
操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，避免RNA降解及交叉污染。
試劑保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)廢棄物需按生物安全規(guī)范處理。
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關(guān)鍵字： 甲型流感（禽流感）病毒H7N4亞型;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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