轉(zhuǎn)基因功能基因Bt染料法熒光定量PCR試劑盒

商品屬性

檢測(cè)原理

基于熒光定量PCR技術(shù)，通過(guò)特異性探針與Bt基因（Bacillus thuringiensis）保守序列結(jié)合，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增熒光信號(hào)，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因成分的定性與定量分析。

適用范圍

檢測(cè)樣本：轉(zhuǎn)基因作物（如Bt棉花、Bt玉米）、食品、飼料及環(huán)境樣本中的Bt基因。

應(yīng)用領(lǐng)域：農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因安全監(jiān)管、食品安全監(jiān)測(cè)、環(huán)境微生物研究等。

性能參數(shù)

檢測(cè)范圍：2×103～1×10? copies/mL

最低檢測(cè)限：1×103 copies/mL（靈敏度顯著高于傳統(tǒng)培養(yǎng)法）

特異性：針對(duì)Bt基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物及探針，避免交叉反應(yīng)。

試劑盒組成

熒光PCR預(yù)混液（含酶、dNTPs、緩沖液）

Bt基因特異性引物及探針

陽(yáng)性對(duì)照（需單獨(dú)存放，防止污染）

陰性對(duì)照

DNA提取試劑（可選）

運(yùn)輸與保存

運(yùn)輸條件：低溫（-20℃）運(yùn)輸。

保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。

操作步驟

樣本處理

取0.5g樣本（組織、食品等）勻漿后離心，提取上清液100μL。

使用配套試劑或標(biāo)準(zhǔn)方法提取DNA。

PCR擴(kuò)增

按比例配制反應(yīng)體系（模板DNA+預(yù)混液+引物探針）。

上機(jī)程序：預(yù)變性（95℃, 5min）→ 40個(gè)循環(huán)（95℃ 10s, 60℃ 30s，熒光采集）。

結(jié)果分析

通過(guò)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算靶基因濃度。

陰性/陽(yáng)性判定：以陰性對(duì)照OD值為基準(zhǔn)，樣本信號(hào)值≥2.1倍閾值時(shí)為陽(yáng)性。

注意事項(xiàng)

嚴(yán)格分區(qū)操作（樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)），避免交叉污染。

陽(yáng)性對(duì)照需最后加入，并在專(zhuān)用區(qū)域操作。

廢棄樣本及耗材需按生物安全規(guī)范處理。

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