腦膜炎奈瑟菌Y群染料法熒光定量PCR試劑盒

商品屬性

檢測原理

基于熒光定量PCR技術，通過特異性引物擴增腦膜炎奈瑟菌Y群保守基因區(qū)域（如ctrA或sodC基因），結合嵌入型熒光染料（如SYBR Green I）實時監(jiān)測擴增產物。熒光信號強度與DNA含量成正比，通過Ct值判定樣本中目標DNA的存在。

試劑盒組成

PCR反應預混液：含緩沖液、dNTPs、Mg2?、熱啟動Taq DNA聚合酶及熒光染料。

特異性引物：針對腦膜炎奈瑟菌Y群設計的引物對。

陽性對照：含腦膜炎奈瑟菌Y群DNA，用于實驗有效性驗證。

陰性對照：無菌水或無模板對照（NTC），排除污染干擾。

核酸提取試劑（可選）：用于臨床樣本（腦脊液、血液等）的DNA提取。

操作步驟

樣本處理：

采集腦脊液、咽拭子等樣本，嚴格無菌操作。

使用配套核酸提取試劑或自動化提取儀提取DNA。

PCR反應體系配制：

按20μL體系混合預混液、引物、模板DNA及對照品。

擴增程序：

預變性：95℃ 5分鐘；

循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（熒光采集）；

熔解曲線分析（可選）：驗證擴增特異性。

結果分析：

陽性樣本：Ct值≤設定閾值，且熔解曲線峰值單一；

陰性樣本：無Ct值或Ct值＞閾值。

性能特點

高特異性：引物經優(yōu)化設計，不與相近微生物DNA交叉反應。

便捷性：預混液含上樣染料，PCR產物可直接電泳。

質控完善：提供陰陽性對照，確保結果可靠性。

注意事項

本試劑盒僅用于科研，不可用于臨床診斷。

避免反復凍融試劑，解凍后需充分混勻。

實驗需在符合生物安全標準的實驗室進行。

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