腸道致細胞病變人孤兒病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 腸道致細胞病變人孤兒病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Enteric Cytopathic Human Orphan Virus (ECHO Virus) Dye-based qRT-PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3227 |
產品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量RT-PCR技術開發(fā)，專用于檢測腸道致細胞病變人孤兒病毒（ECHO病毒）的RNA。通過實時監(jiān)測熒光信號，實現對樣本的定性和定量分析，適用于科研用途。
技術原理
采用實時熒光定量PCR技術，通過熒光染料（如SYBR Green I）與雙鏈DNA結合釋放熒光信號，實時監(jiān)測擴增過程。通過標準曲線計算目標RNA的初始拷貝數，實現定量分析。
產品特點
操作簡便：一管式反應體系，用戶僅需提供RNA樣本。
高靈敏度：檢測下限為1.0 ng/μL（RNA），混合樣本中成分檢測下限為0.5%。
快速高效：全程檢測時間約2小時（單樣本）。
兼容性強：適用于普通PCR儀及凝膠電泳設備，無需特殊儀器。
穩(wěn)定性高：優(yōu)化引物設計，避免非特異性擴增。
應用范圍：支持組織、細胞、血液等多種樣本類型（需根據樣本調整提取方法）。
試劑盒組成
熒光定量PCR預混液（含染料、dNTPs、酶等）
ECHO病毒特異性引物
陽性對照（標準品）
陰性對照
RNase-free水
說明書
實驗流程
RNA提取（樣本制備區(qū)）：
使用兼容的RNA提取試劑（如Trizol法或商業(yè)試劑盒），避免DNA污染。
樣本建議保存于液氮、干冰或Trizol液中。
反轉錄（RT）：
將提取的RNA反轉錄為cDNA（若試劑盒未集成RT步驟，需單獨進行）。
熒光定量PCR（擴增區(qū)）：
按說明書配制反應體系（示例：40 μL體系）。
設置標準曲線（稀釋陽性對照）及待測樣本，同步運行陰性對照。
程序：預變性（95℃, 5 min）→ 循環(huán)擴增（95℃ 10 s, 60℃ 30 s, 40循環(huán)）→ 熔解曲線分析。
數據分析：
通過閾值循環(huán)數（Ct值）和標準曲線計算RNA濃度。
熔解曲線驗證擴增特異性。
注意事項
分區(qū)操作：樣本制備、試劑配制、擴增需在不同區(qū)域進行，避免污染。
質量控制：每次實驗需包含陰陽性對照。
樣本要求：提供完整樣本信息（如物種、基因名稱/ID），避免直接提交降解的RNA/DNA。
適用范圍：僅限科研，不適用于臨床診斷。
儲存與運輸
保存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
有效期：12個月（詳見包裝標簽）。
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關鍵字： 腸道致細胞病變人孤兒病毒;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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