不動桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 不動桿菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Acinetobacter spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3443 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術(shù)開發(fā)，專用于不動桿菌屬的快速、高靈敏度檢測。通過優(yōu)化設(shè)計的引物和探針靶向高度保守序列，確保特異性強(qiáng)，避免與其他病原體RNA交叉反應(yīng)。適用于科研用途（不可用于臨床診斷）。
技術(shù)原理
熒光定量PCR：在PCR反應(yīng)體系中加入熒光探針，通過實(shí)時監(jiān)測熒光信號擴(kuò)增曲線，實(shí)現(xiàn)核酸定量檢測。
反轉(zhuǎn)錄（RT）：若檢測對象為RNA，需先通過逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
試劑盒組成
預(yù)混液：含dNTPs、Taq DNA聚合酶、緩沖液等
引物探針混合液：針對不動桿菌屬保守序列設(shè)計
陽性對照：不動桿菌屬標(biāo)準(zhǔn)品（用于質(zhì)控）
陰性對照：無核酸酶水（排除污染干擾）
操作步驟
樣本處理：
組織樣本：液氮研磨后加裂解液提取RNA/DNA。
全血樣本：紅細(xì)胞裂解后提取核酸。
反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）：
模板DNA/RNA 2μL
預(yù)混液10μL
引物探針混合液2μL
無核酸酶水補(bǔ)至20μL
PCR程序：
| 步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
| 退火 | 55-60℃* | 20 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec | |
| 終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*注：退火溫度需根據(jù)引物Tm值調(diào)整。
性能參數(shù)
靈敏度：可檢測低至幾百拷貝/反應(yīng)的靶標(biāo)。
特異性：不與常見病原體核酸發(fā)生交叉反應(yīng)。
穩(wěn)定性：-20℃保存有效期1年，避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)需在無菌環(huán)境下操作，防止污染。
陽性對照與待測樣本需分區(qū)域處理，避免假陽性。
若出現(xiàn)無擴(kuò)增信號，需檢查試劑活性或重新優(yōu)化反應(yīng)條件。
運(yùn)輸與儲存
運(yùn)輸條件：低溫（-20℃）運(yùn)輸。
保存條件：-20℃避光保存，開封后建議分裝使用。
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關(guān)鍵字： 不動桿菌屬通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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