口腔支原體染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 口腔支原體染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Mycoplasma orale Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3447 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，專用于口腔支原體（Mycoplasma spp.）的快速、高靈敏度檢測，適用于科研用途。試劑盒采用優(yōu)化引物及反應(yīng)體系，可實現(xiàn)對口腔支原體DNA的定性和定量分析，靈敏度達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)，特異性強，與相近病原體無交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品組成
預(yù)混PCR反應(yīng)液：含熱啟動Taq酶、dNTPs、熒光染料及緩沖體系（20μL/反應(yīng)）。
陽性對照：已知濃度的口腔支原體DNA（1×10^8拷貝/μL）。
陰性對照：無核酸酶水。
ROX參比染料（可選）：用于校正加樣誤差（需根據(jù)機型選擇）。
技術(shù)參數(shù)
檢測范圍：定性或定量檢測，定量線性范圍≥5個數(shù)量級。
靈敏度：最低檢出限2-4個基因組/反應(yīng)。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月，避免反復(fù)凍融。
規(guī)格：50次反應(yīng)（20μL體系/次）。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備
梯度稀釋陽性對照（10^7~10^2拷貝/μL），依次加入PCR管中。
每管加入45μL稀釋液，震蕩混勻后冰上備用。
2. 樣品DNA提取
使用兼容的核酸純化方法制備待測樣本DNA，建議設(shè)置陰/陽性對照。
3. qPCR反應(yīng)體系（20μL）
按比例混合預(yù)混液、模板DNA（或標(biāo)準(zhǔn)品）及ROX染料（若需）。
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 2分鐘→（95℃ 15秒→60℃ 30秒）×40循環(huán)。
4. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣本濃度。
定性檢測：通過Ct值及擴增曲線判定陽性/陰性。
注意事項
自備試劑：DNA模板、無核酸酶水、移液器及耗材（建議使用帶芯槍頭）。
污染控制：分設(shè)樣品制備區(qū)與PCR區(qū)，避免氣溶膠污染。
質(zhì)量控制：每批次實驗需包含陰/陽性對照，排除假陰性或污染。
運輸與存儲
低溫（-20℃）運輸，保存于-20℃避光環(huán)境，開封后避免反復(fù)凍融。
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