產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)（如SYBR Green I），專用于檢測(cè)長(zhǎng)鼻分咽線蟲（Dispharynx nasuta）的特異性基因序列（如ITS區(qū)域或線粒體COI基因）。通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)病原體的定性與定量分析，適用于動(dòng)物腸道組織、糞便、血液等樣本的科研檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 長(zhǎng)鼻分咽線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Longistrongylus elongatus Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR3357 |
核心參數(shù)
規(guī)格：50次反應(yīng)（20μL體系/次）
靈敏度：≤100拷貝/反應(yīng)
特異性：針對(duì)長(zhǎng)鼻分咽線蟲保守序列設(shè)計(jì)，與其他線蟲（如蛔蟲、鉤蟲）無(wú)交叉反應(yīng)。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
適用儀器：ABI 7500、LightCycler等主流熒光定量PCR儀。
試劑盒組成
| 成分 | 規(guī)格（50次） | 功能說(shuō)明 |
| 2×qPCR預(yù)混液 | 500μL | 含DNA聚合酶、dNTPs、SYBR Green I染料 |
| 熒光PCR模板稀釋液 | 1mL | 樣本及對(duì)照稀釋 |
| 長(zhǎng)鼻分咽線蟲引物混合液 | 100μL | 特異性擴(kuò)增目標(biāo)基因 |
| 陽(yáng)性對(duì)照（DNA片段） | 50μL | 定量標(biāo)準(zhǔn)品（1×10?拷貝/μL） |
| 陰性對(duì)照（超純水） | 1mL | 污染監(jiān)控 |
操作流程
樣本DNA制備
樣本類型：腸道組織、糞便等。
提取方法：推薦柱式法提取DNA，確保純度（A260/A280≈1.8-2.0）。
反應(yīng)體系配制（冰上操作）
20μL體系：
2×qPCR預(yù)混液：10μL
引物混合液：2μL
模板DNA：2μL
超純水補(bǔ)至20μL。
PCR擴(kuò)增程序
循環(huán)條件：
95℃預(yù)變性5min → [95℃變性15s → 60℃退火/延伸45s] ×40循環(huán)。
溶解曲線分析：60℃至95℃，每0.5℃采集熒光信號(hào)。
結(jié)果分析
定量：以陽(yáng)性對(duì)照Ct值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本拷貝數(shù)。
定性：Ct值≤35且溶解曲線為單一峰判定為陽(yáng)性。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需分區(qū)（樣本處理、PCR配制、擴(kuò)增區(qū)），避免氣溶膠污染。
陽(yáng)性對(duì)照需獨(dú)立稀釋，防止污染其他組分。
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關(guān)鍵字： 長(zhǎng)鼻分咽線蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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