多食棘阿米巴屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 多食棘阿米巴屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Acanthamoeba polyphaga spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3625 |
檢驗原理
本試劑盒采用SYBR Green染料法實時熒光PCR技術，針對多食棘阿米巴屬通用基因高度保守區(qū)域設計特異性引物。在PCR擴增過程中，SYBR Green染料與雙鏈DNA結合釋放熒光信號，通過實時監(jiān)測熒光強度變化，實現對靶標核酸的定性和定量分析。
試劑組成
| 組分名稱 | 規(guī)格 |
| 多食棘阿米巴屬通用擴增液 | 50μL×1管 |
| 多食棘阿米巴屬通用反應液 | 950μL×1管 |
| 陽性質控品 | 50μL×1管 |
| 陰性質控品 | 50μL×1管 |
| 說明書 | 1份 |
注意事項：
不同批號試劑組分不可混用。
試劑盒內組分可滿足標稱檢測次數。
儲存條件及有效期
儲存條件：-20℃±5℃，避光保存，避免反復凍融（建議凍融次數＜7次）。
有效期：12個月。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀，包括：
ABI系列（如7500、StepOnePlus）
MX3000P/3005P
LightCycler（Roche）
Bio-Rad（CFX系列）
Eppendorf（Mastercycler ep realplex）
需自備耗材：
無DNA/RNA酶的1.5mL離心管、0.2mL PCR反應管
濾芯吸頭（10μL、200μL、1000μL）
離心機、振蕩混合器、移液器
樣品要求
樣本類型：胃液分泌物、胃液嘔吐物、培養(yǎng)物等，采集需參照《臨床微生物樣本采集規(guī)范》。
保存條件：
短期：-20℃±5℃
長期：-70℃以下（保存期≤6個月）
運輸要求：2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。
操作步驟（基于SYBR Green法）
反應體系配制（冰上操作）：
按比例混合擴增液、反應液及模板DNA（具體體積參考說明書）。
PCR程序設置：
預變性：95℃ 3-5分鐘
循環(huán)擴增（35個循環(huán)）：
變性：93℃ 40秒
退火：58℃ 30秒
延伸：72℃ 60秒
終延伸：72℃ 7分鐘
數據分析：根據儀器軟件生成擴增曲線和Ct值判定結果。
質量控制
每批次實驗需同時檢測陽性質控品（應呈陽性擴增）和陰性質控品（無擴增信號）。
注意事項
實驗環(huán)境需嚴格分區(qū)（試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)），避免交叉污染。
廢棄樣本及耗材需按生物危害廢物處理。
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