預期用途
用于定性或定量檢測鄂木斯克出血熱病毒RNA，適用于科研用途，不適用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | 鄂木斯克出血熱病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 | 英文名稱 | Omsk Hemorrhagic Fever Virus (OHFV) Dye-based qRT-PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR3565 |
產(chǎn)品特點
高靈敏性：引物針對OHFV高度保守區(qū)設計，檢測限低至10^2拷貝/μL。
特異性強：與其他出血熱病毒（如克里米亞-剛果出血熱病毒）無交叉反應。
操作簡便：預混反應體系，用戶僅需提供RNA模板。
兼容性廣：適配多數(shù)商業(yè)核酸提取試劑盒提取的RNA樣本。
定量功能：標準曲線線性范圍覆蓋5個數(shù)量級（10^2~10^7拷貝/μL）。
試劑盒組成
| 成分 | 規(guī)格（50次） | 保存條件 |
| qRT-PCR預混液（染料法） | 500 μL | -20℃避光 |
| RT-PCR酶混合液 | 100 μL | -20℃避光 |
| 陽性對照（OHFV RNA） | 50 μL | -80℃（避免反復凍融） |
| DEPC-H2O | 1 mL | 室溫 |
實驗步驟
1. RNA提取
使用兼容的核酸提取試劑盒從血清、組織等樣本中提取RNA，建議使用DNase處理以去除基因組DNA污染。
2. 反應體系配制（樣本制備區(qū)）
每20μL反應體系：
預混液 10 μL
酶混合液 2 μL
RNA模板 5 μL
DEPC-H2O 補至20 μL
3. 標準曲線制備（獨立區(qū)域操作）
將陽性對照按10倍梯度稀釋（10^7~10^2拷貝/μL），用于生成標準曲線。
4. PCR程序設置
逆轉錄：50℃ 15分鐘
預變性：95℃ 2分鐘
擴增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（熒光采集）
結果判讀
定性檢測：Ct值≤35且擴增曲線呈S型判為陽性。
定量檢測：根據(jù)標準曲線計算樣本病毒載量。
注意事項
避免試劑反復凍融，開封后需分裝保存。
實驗分區(qū)操作（樣本制備區(qū)、擴增區(qū)），防止氣溶膠污染。
廢棄物的處理需符合生物安全規(guī)范。
保存與運輸
保存溫度：-20℃避光（有效期12個月）。
運輸條件：干冰或冰袋低溫運輸。
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關鍵字： 鄂木斯克出血熱病毒;染料法熒光定量;RT-PCR試劑盒;
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