產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品組成
酶標(biāo)包被板：預(yù)包被FABP4抗體的微孔板。
標(biāo)準品：含已知濃度FABP4的凍干品。
酶標(biāo)抗體：HRP標(biāo)記的FABP4抗體。
洗滌液：用于洗滌反應(yīng)板。
底物液：TMB顯色液。
終止液：硫酸溶液。
其他試劑：樣本稀釋液、封板膜等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP4)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Mouse FABP4 ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A115723 |
實驗原理
采用雙抗體夾心法。將FABP4抗體包被在微孔板上，加入樣本和酶標(biāo)抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。加入底物TMB顯色，顏色深淺與FABP4濃度正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，計算濃度。
檢測范圍與靈敏度
檢測范圍：通常為31.25-2000pg/mL。
靈敏度：可檢測低濃度的FABP4，具體數(shù)值請參考產(chǎn)品說明書。
適用樣本
可用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等液體樣本的檢測。
操作步驟
準備試劑和樣本：將試劑盒各組分平衡至室溫，制備樣本和標(biāo)準品。
加樣：在酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準品、樣本和相關(guān)試劑。
溫育：37℃溫育30分鐘，使抗原抗體充分反應(yīng)。
洗滌：洗去未結(jié)合的物質(zhì)，避免干擾。
加酶標(biāo)抗體：加入酶標(biāo)記的抗體，再次溫育。
再次洗滌：洗去多余的酶標(biāo)抗體。
顯色：加入底物液，避光顯色一定時間。
終止反應(yīng)：加入終止液終止顯色反應(yīng)。
讀數(shù)：使用酶標(biāo)儀測定各孔吸光度，根據(jù)標(biāo)準曲線計算樣本中的FABP4含量。
注意事項
樣本處理：避免溶血、污染和反復(fù)凍融。
試劑使用：嚴格按照說明書操作，避免使用其他廠家的試劑替換。
洗滌步驟：充分洗滌，避免假陽性結(jié)果。
結(jié)果解讀：每次實驗需做標(biāo)準曲線，確保結(jié)果準確。
儲存條件
未開封試劑盒：按各組分標(biāo)簽所示保存，通常標(biāo)準品和酶標(biāo)記抗體需-20℃保存，其他試劑4℃保存。
開封后試劑盒：剩余試劑按標(biāo)簽保存，酶標(biāo)板需干燥密封于-20℃。
試劑與樣本準備階段：
溫度平衡（最容易被忽視的點）
操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標(biāo)準品、酶標(biāo)試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。
后果： 冷試劑直接使用會導(dǎo)致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結(jié)晶析出。配制時必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標(biāo)試劑和顯色液（如 TMB）對光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。
樣本處理
避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細胞破裂），會釋放過氧化物酶，導(dǎo)致假陽性或背景過高。
離心去雜質(zhì)： 血液或細胞上清樣本在加樣前最好進行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過高，超出標(biāo)準曲線范圍，必須進行預(yù)實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
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關(guān)鍵字： 小鼠脂肪酸結(jié)合蛋白4 ;FABP4;ELISA試劑盒;
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