檢驗原理
本試劑盒基于TaqMan探針法實時熒光RT-PCR技術,針對小反芻獸疫病毒野毒株(PPRV-W)基因組高度保守區(qū)域設計特異性引物和熒光探針。通過熒光信號實時監(jiān)測核酸擴增過程,實現(xiàn)對PPRV-W的定性檢測,適用于臨床可疑感染樣本的病原學診斷。
產(chǎn)品名稱
小反芻獸疫病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
英文名稱
Peste des Petits Ruminants Virus (PPRV) Dye-based qRT-PCR Kit
產(chǎn)品規(guī)格
50T
產(chǎn)品分類
熒光定量PCR
檢測類型
PCR檢測
產(chǎn)品貨號
PR3692
試劑組成
25T/盒:
PPRV RT-PCR反應液:437.5 μL ×1管
PPRV混合酶液:62.5 μL ×1管
陽性對照(滅活PPRV cDNA):40 μL ×1管
陰性對照(偶蹄獸類基因組DNA):40 μL ×1管
說明書:1份
50T/盒:
PPRV RT-PCR反應液:875 μL ×1管
PPRV混合酶液:125 μL ×1管
陽性對照:40 μL ×1管
陰性對照:40 μL ×1管
注意:不同批號試劑組分不可混用。
儲存條件及有效期
避光保存于-20℃以下,避免反復凍融,有效期12個月。
適用儀器
支持多通道實時熒光定量PCR儀,包括但不限于:
ABI系列(如7500、QuantStudio)
Bio-Rad系列(如CFX96)
Roche LightCycler 480
杭州博日系列等
操作流程
樣本處理:提取待檢樣本RNA。
反應體系配制:按比例混合反應液、酶液及模板RNA。
PCR擴增:
逆轉錄:50℃ 15-30分鐘(若需)。
預變性:95℃ 2-5分鐘。
循環(huán)擴增:95℃ 10-15秒 → 60℃ 30-60秒(40-45循環(huán))。
結果判讀:
陽性:Ct值≤設定閾值,且擴增曲線呈典型S型。
陰性:無Ct值或Ct值>閾值。
注意事項
實驗需在生物安全二級(BSL-2)實驗室進行。
試劑開封后避免污染,建議分裝使用。
陰陽性對照需與樣本同步檢測。
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