產(chǎn)品概述
本試劑盒采用染料法熒光定量PCR技術(shù)，專為纖維單胞菌（Cellulomonas spp.）的快速、高靈敏度檢測(cè)設(shè)計(jì)。適用于環(huán)境樣本、臨床標(biāo)本或工業(yè)發(fā)酵液中纖維單胞菌的定性與定量分析，檢測(cè)限低至100拷貝/反應(yīng)，線性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)。
產(chǎn)品名稱 | 纖維單胞菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Cellulomonas spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR3705 |
試劑盒組成
2× SYBR qPCR MasterMix（0.5 mL/管）：含優(yōu)化緩沖液、dNTPs、熱啟動(dòng)DNA聚合酶及SYBR Green I熒光染料。
熒光PCR專用模板稀釋液（1 mL/管）：用于標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋或樣本預(yù)處理。
陽性對(duì)照（凍干菌株DNA）：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性，排除假陰性干擾。
陰性對(duì)照（無核酸酶水）：監(jiān)控交叉污染。
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)方法：SYBR Green I染料法，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增熒光信號(hào)。
靈敏度：100拷貝/反應(yīng)。
特異性：引物針對(duì)纖維單胞菌保守序列設(shè)計(jì)，經(jīng)驗(yàn)證無交叉反應(yīng)。
規(guī)格：50次反應(yīng)（20 μL體系/次）。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
操作流程
樣本制備：提取待測(cè)樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
反應(yīng)體系配制：
2× SYBR MasterMix：10 μL
引物混合物（未提供需另購）：各0.4 μM
模板DNA：2 μL
補(bǔ)無核酸酶水至20 μL。
PCR程序：
預(yù)變性：95℃ 3分鐘；
擴(kuò)增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)，采集熒光）；
熔解曲線分析：60℃~95℃（0.5℃/秒）。
注意事項(xiàng)
避免反復(fù)凍融試劑，溶解后需短暫離心。
熔解曲線需呈現(xiàn)單一峰形，確保擴(kuò)增特異性。
實(shí)驗(yàn)需在符合生物安全標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
質(zhì)量控制
陽性對(duì)照Ct值≤35，陰性對(duì)照無擴(kuò)增曲線，否則實(shí)驗(yàn)無效。
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關(guān)鍵字： 纖維單胞菌通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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