產(chǎn)品介紹：

一、核心檢測(cè)信息

檢測(cè)目標(biāo)

特異性定量大鼠全血、肝臟/腦組織勻漿或細(xì)胞裂解液中的 谷胱甘肽還原酶（GR），一種依賴NADPH的黃素酶，通過(guò)催化氧化型谷胱甘肽（GSSG）還原為還原型谷胱甘肽（GSH），維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原平衡，是抗氧化防御系統(tǒng)的核心組分。

檢測(cè)原理

雙抗體夾心ELISA：

預(yù)包被抗大鼠GR抗體（靶向FAD結(jié)合結(jié)構(gòu)域）捕獲目標(biāo)酶 → 生物素標(biāo)記二抗結(jié)合 → HRP-鏈霉親和素-TMB顯色系統(tǒng)（450nm主波長(zhǎng)/630nm參比波長(zhǎng)讀數(shù)）。

可選酶活性檢測(cè)模塊：通過(guò)監(jiān)測(cè)NADPH在340nm的吸光度下降速率計(jì)算酶活性（單位：mU/mg蛋白）。

二、技術(shù)參數(shù)與驗(yàn)證

關(guān)鍵指標(biāo)  技術(shù)說(shuō)明

檢測(cè)范圍  0.5-50 ng/mL（蛋白濃度）或 0.1-10 U/mL（酶活性）

最低檢測(cè)限  0.15 ng/mL（蛋白）或 0.03 U/mL（活性）

樣本兼容性  全血（肝素抗凝）、肝組織線粒體提取物、紅細(xì)胞裂解液

特異性驗(yàn)證  不與大鼠硫氧還蛋白還原酶（TrxR）、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）交叉

抗氧化干擾處理  試劑盒含DTT清除劑，避免樣本中游離硫醇干擾

三、典型應(yīng)用場(chǎng)景

氧化應(yīng)激研究

酒精性肝病模型中GR活性下降與脂質(zhì)過(guò)氧化（MDA水平）的負(fù)相關(guān)性分析

神經(jīng)退行性疾病

帕金森病模型黑質(zhì)區(qū)GR表達(dá)異常與多巴胺能神經(jīng)元損傷的關(guān)系

毒理學(xué)評(píng)估

重金屬（如鎘）暴露后紅細(xì)胞GR活性作為氧化損傷的生物標(biāo)志物

四、操作關(guān)鍵要點(diǎn)

樣本處理

全血樣本：需用冷PBS（含1mM EDTA）1:5稀釋后裂解紅細(xì)胞（避免凍融）

線粒體提取物：建議使用蔗糖密度梯度離心法純化，檢測(cè)前加入0.1% Triton X-100釋放膜結(jié)合酶

實(shí)驗(yàn)優(yōu)化

酶活性檢測(cè)需避光操作（NADPH光敏感性）

每板設(shè)置內(nèi)參對(duì)照（如大鼠肝細(xì)胞質(zhì)提取物）

五、注意事項(xiàng)

干擾排除

高膽紅素樣本（＞10 mg/dL）需用活性炭吸附預(yù)處理

數(shù)據(jù)解讀

建議聯(lián)合檢測(cè)GSH/GSSG比值及SOD活性以全面評(píng)估抗氧化狀態(tài)

保存規(guī)范

未開封試劑盒4℃避光保存（有效期12個(gè)月），NADPH溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用

試劑與樣本準(zhǔn)備階段

溫度平衡（最容易被忽視的點(diǎn)）

 操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。

后果： 冷試劑直接使用會(huì)導(dǎo)致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴(yán)重影響 OD 值。

試劑配制

洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會(huì)有結(jié)晶析出。配制時(shí)必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。

現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標(biāo)試劑和顯色液（如 TMB）對(duì)光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。

樣本處理

避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細(xì)胞破裂），會(huì)釋放過(guò)氧化物酶，導(dǎo)致假陽(yáng)性或背景過(guò)高。

離心去雜質(zhì)： 血液或細(xì)胞上清樣本在加樣前最好進(jìn)行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。

稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過(guò)高，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，必須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定稀釋倍數(shù)。計(jì)算結(jié)果時(shí)記得乘以稀釋倍數(shù)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

體液（folic acid）含量微生物比色法定量檢測(cè)試劑盒	睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體
石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）直接染色試劑盒	轉(zhuǎn)錄因子MAFG抗體
PROTHROMBINASE INDUCED CLOTTING TIME；PiCT	Phocein蛋白抗體
乙型肝炎病毒X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白4抗體	絲氨酸蛋白酶抑制劑A10抗體
磷酸化組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶KAT5抗體	APC標(biāo)記人CD33單克隆抗體
促甲狀腺激素釋放激素受體抗體	抗Ⅵ型膠原抗體
抑制因子DKK4抗體	（Bilirubin）定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶（Adenylate Cyclase）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒	細(xì)胞檸檬酸合成酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
體液肌酸激酶同工酶混合型（CK-MB）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒	G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體
載玻片細(xì)胞P35蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒	胎盤表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子1蛋白抗體
病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒	EFCAB6蛋白抗體
血液脯氨酰肽酶（prolinase）比色法定量檢測(cè)試劑盒	化妝品氨比色法定量檢測(cè)試劑盒
環(huán)指蛋白170抗體	大鼠谷胱甘肽還原酶(GR)ELISA試劑盒體液羥賴（HYL）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒	同位素核酸（PCR產(chǎn)物）蛋白結(jié)合DNA酶足跡法分析試劑盒

ELISA試劑盒的主要優(yōu)點(diǎn)

ELISA之所以被廣泛應(yīng)用，主要?dú)w功于以下幾個(gè)核心優(yōu)勢(shì)：

靈敏度高（抓得準(zhǔn)）：

它利用酶的催化放大作用，能將微弱的信號(hào)放大，因此可以檢測(cè)到樣本中極低濃度的目標(biāo)物質(zhì)（甚至達(dá)到皮克級(jí) pg/mL）。哪怕樣本里只有微量的病毒、激素或蛋白質(zhì)，它也能“捕捉”到。

特異性強(qiáng)（瞄得準(zhǔn)）：

基于抗原-抗體的特異性結(jié)合原理，試劑盒中的抗體通常只與目標(biāo)物質(zhì)反應(yīng)，很少受樣本中其他雜質(zhì)的干擾。這大大降低了假陽(yáng)性率，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

操作簡(jiǎn)便且快速：

相比于一些復(fù)雜的儀器分析方法，ELISA的操作流程相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化。市面上的試劑盒通常是一套完整的組件，按照說(shuō)明書進(jìn)行加樣、孵育、洗板、顯色即可。整個(gè)過(guò)程通常在幾小時(shí)內(nèi)就能完成。

高通量與適用性廣：

它通常采用96孔板或48孔板，一次實(shí)驗(yàn)可以同時(shí)處理幾十個(gè)樣本，非常適合大規(guī)模的流行病學(xué)篩查或批量科研實(shí)驗(yàn)。此外，它不僅能測(cè)蛋白，還能測(cè)抗體、激素、藥物殘留甚至農(nóng)藥，應(yīng)用領(lǐng)域覆蓋了醫(yī)學(xué)、食品安全和環(huán)境監(jiān)測(cè)。

安全穩(wěn)定：

不像放射免疫法那樣使用放射性同位素，ELISA使用的是酶標(biāo)記，對(duì)人體和環(huán)境無(wú)輻射危害，且試劑保存時(shí)間較長(zhǎng)。