尼氏單孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 尼氏單孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Haplosporidium nelsoni Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3850 |
檢驗(yàn)原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法實(shí)時熒光PCR技術(shù)，針對尼氏單孢子蟲（Haplosporidium nelsoni）基因高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物。通過熒光信號實(shí)時監(jiān)測核酸擴(kuò)增過程，實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)核酸的定性和定量分析。
試劑組成
預(yù)混PCR Master Mix（含SYBR Green染料、dNTPs、耐熱DNA聚合酶等）
尼氏單孢子蟲特異性引物
陽性對照（標(biāo)準(zhǔn)品）
陰性對照（無核酸酶水）
其他輔助試劑（如緩沖液、DEPC-H2O等）
保存條件與有效期
保存溫度：-20℃以下避光保存
有效期：12個月
使用方法
樣本DNA提取
使用兼容的核酸提取試劑盒或自選方法提取純化樣本DNA。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測適用）
將陽性對照梯度稀釋（建議5個數(shù)量級，如10^7~10^3拷貝/μL），用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
每個稀釋步驟需更換槍頭，避免交叉污染。
PCR反應(yīng)體系配制
按20μL/反應(yīng)配制體系，包含預(yù)混Master Mix、引物、模板DNA及對照。
熒光定量PCR程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
擴(kuò)增循環(huán)：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號），共40個循環(huán)
熔解曲線分析：60℃~95℃，逐步升溫（驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）
性能參數(shù)
靈敏度：可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)
特異性：與相近病原體無交叉反應(yīng)
線性范圍：定量檢測時覆蓋至少5個數(shù)量級
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
操作需分區(qū)進(jìn)行（樣本制備區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)），避免污染。
試劑解凍后需充分混勻，避免反復(fù)凍融。
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關(guān)鍵字： 尼氏單孢子蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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