兔牙周膜成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔牙周膜成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源 牙周膜組織
種屬 兔

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

培養(yǎng)信息：

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙周膜成纖維細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙周膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱：兔牙周膜成纖維細(xì)胞

英文簡(jiǎn)稱：PDLFs

組織來(lái)源：牙周膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶兔牙周膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介 ：

兔牙周膜成纖維細(xì)胞分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶、牙周間隙）是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi)，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi)；牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細(xì)胞（PLFs）作為牙周膜的主體細(xì)胞，是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞，它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過(guò)程?，F(xiàn)在，利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
原代細(xì)胞接種：

細(xì)胞計(jì)數(shù)與密度調(diào)整

使用血球計(jì)數(shù)板或細(xì)胞計(jì)數(shù)儀準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度至合適范圍（不同細(xì)胞類(lèi)型差異較大，一般為1×10?-1×10?cells/ml）

密度過(guò)低：細(xì)胞無(wú)法分泌足夠的生長(zhǎng)因子，難以存活；密度過(guò)高：細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，易出現(xiàn)接觸抑制

培養(yǎng)基選擇

優(yōu)先使用原代細(xì)胞專用培養(yǎng)基，若使用通用培養(yǎng)基，需添加合適的生長(zhǎng)因子、血清等補(bǔ)充成分（如成纖維細(xì)胞添加FGF，內(nèi)皮細(xì)胞添加VEGF）

血清濃度：原代細(xì)胞培養(yǎng)血清濃度一般為10%-20%，部分特殊細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞）需使用無(wú)血清培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境控制

溫度：哺乳動(dòng)物細(xì)胞一般為37℃，鳥(niǎo)類(lèi)細(xì)胞38.5℃，昆蟲(chóng)細(xì)胞27℃

CO?濃度：大多數(shù)細(xì)胞需要5%CO?，維持培養(yǎng)基pH在7.2-7.4之間

濕度：培養(yǎng)箱濕度保持在70%-80%，避免培養(yǎng)基蒸發(fā)過(guò)快
公司正在出售的產(chǎn)品：

原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

取材要快、要新鮮、全程無(wú)菌

組織離體時(shí)間越短越好，冰上操作，減少缺血損傷。

嚴(yán)格控制細(xì)胞代數(shù)

原代細(xì)胞只建議用 P0～P3，代數(shù)越高越容易分化、結(jié)果越不可靠。

接種密度寧高不低

原代細(xì)胞普遍怕稀，太稀不貼壁、不生長(zhǎng)、容易凋亡。

消化是關(guān)鍵，寧輕勿重

胰酶 / 膠原酶只消化到細(xì)胞變圓就終止，過(guò)度消化必死一批。

吹打輕柔，避免機(jī)械損傷。

培養(yǎng)基和血清不要隨便換批次

血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、添加因子固定廠家固定批次，換批次必須先預(yù)實(shí)驗(yàn)。

避免頻繁折騰細(xì)胞

少開(kāi)培養(yǎng)箱門(mén)，不反復(fù)觀察、不反復(fù)拿進(jìn)拿出，溫度、pH 波動(dòng)對(duì)原代殺傷極大。