兔牙齦成纖維細胞

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔牙齦成纖維細胞

組織來源 牙齦組織
種屬 兔

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

培養(yǎng)信息：

方法簡介：實驗室分離的兔牙齦成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：實驗室分離的兔牙齦成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱：兔牙齦成纖維細胞

組織來源：牙齦組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶兔牙齦成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介 ：

兔牙齦成纖維細胞分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
細胞消化與傳代：

方法一：利多卡因消化法

吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞1次

添加1ml 12mM利多卡因消化液，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶使液體覆蓋瓶底，37℃溫浴3-5分鐘

顯微鏡下觀察到細胞回縮變圓后，加入5ml完全培養(yǎng)基稀釋消化液

輕輕吹打混勻細胞，1200rpm離心5分鐘，棄上清后用完全培養(yǎng)基重懸接種

方法二：胰酶消化法

若利多卡因消化效果不佳，可更換為0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重復(fù)上述操作，消化時間控制在1-2分鐘

方法三：細胞刮取法

若細胞仍無法消化，加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化，用無菌細胞刮輕輕刮取細胞（此方法易造成細胞機械損傷，不推薦）
公司正在出售的產(chǎn)品：

收貨與處理流程：

1. 收貨檢查

收到細胞后首先觀察T25培養(yǎng)瓶瓶身是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有異常及時聯(lián)系。

2. 細胞復(fù)蘇（僅針對凍存細胞）

將凍存管迅速放入37℃溫水中搖晃融化，時間約1分鐘

加入4-5ml完全培養(yǎng)基混勻，1000RPM常溫離心4-5分鐘

棄去上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液吹勻，移入含5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜，第二天換液并檢查細胞密度

3. 新鮮細胞處理

用75%酒精消毒培養(yǎng)瓶瓶身，拆下封口膜

放入37℃、5%CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時，穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再進行后續(xù)操作