兔牙齦成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
英文名稱：Rabbit Gingival Fibroblast Cells
組織來(lái)源：牙齦
默認(rèn)種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的兔牙齦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔牙齦成纖維細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 牙齦 |
英文名稱 | Rabbit Gingival Fibroblast Cells | 貨號(hào) | A01X2234 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔牙齦成纖維分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅(jiān)韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動(dòng)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔牙齦成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)，形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞生長(zhǎng)較快。
取材與剪切
同樣在無(wú)菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動(dòng)或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞時(shí)，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細(xì)胞懸液通過(guò)篩網(wǎng)過(guò)濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
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獲取與培養(yǎng)的挑戰(zhàn)：
盡管價(jià)值巨大，但原代細(xì)胞的研究和應(yīng)用也面臨著顯著的挑戰(zhàn)：
獲取困難：需要從新鮮組織中分離，對(duì)取材時(shí)間（通常在4-6小時(shí)的黃金窗口期內(nèi)）、無(wú)菌操作和組織活性都有極高要求。
培養(yǎng)苛刻：原代細(xì)胞非常脆弱，需要特定的、成分復(fù)雜的培養(yǎng)基和生長(zhǎng)因子，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、pH值）極為敏感。
批次差異：由于來(lái)源于不同的供體，不同批次的細(xì)胞在遺傳背景和生理狀態(tài)上存在固有差異，這給實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性帶來(lái)了挑戰(zhàn)。
成本高昂：從獲取、分離到培養(yǎng)，整個(gè)過(guò)程耗時(shí)、費(fèi)力且昂貴。
關(guān)鍵字： 兔牙齦成纖維細(xì)胞;牙齦;貼壁;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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