人牙齦成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱(chēng) 人牙齦成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源 牙齦組織
種屬 人

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

培養(yǎng)信息：

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的人牙齦成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的人牙齦成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱(chēng)：人牙齦成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源：牙齦組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶人牙齦成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介 ：

人牙齦成纖維細(xì)胞分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周?chē)班徑难啦酃巧系t色的結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅(jiān)韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動(dòng)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
凍存復(fù)蘇：

凍存的梯度降溫：

逐步降溫：細(xì)胞凍存時(shí)，先在4℃放置30分鐘，再在-20℃放置1小時(shí)，隨后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過(guò)夜，最后放入液氮長(zhǎng)期保存，避免溫度驟變導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶形成。

標(biāo)記清晰：凍存管上需標(biāo)記細(xì)胞名稱(chēng)、代次、凍存日期和操作者姓名，避免后續(xù)復(fù)蘇時(shí)混淆。

復(fù)蘇的快速操作：

解凍后立即離心：細(xì)胞解凍后迅速轉(zhuǎn)移至含預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心去除含DMSO的凍存液，減少DMSO對(duì)細(xì)胞的毒性。

復(fù)蘇后靜置培養(yǎng)：復(fù)蘇后的細(xì)胞接種后，24小時(shí)內(nèi)不要換液，讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間恢復(fù)狀態(tài)，24小時(shí)后再更換新鮮培養(yǎng)基。
公司正在出售的產(chǎn)品：

原代細(xì)胞培養(yǎng)：

培養(yǎng)基選擇：根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇專(zhuān)用培養(yǎng)基，如上皮細(xì)胞用上皮細(xì)胞培養(yǎng)基、成纖維細(xì)胞用成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基，必要時(shí)添加血清（胎牛血清FBS常用，濃度10%-20%）、生長(zhǎng)因子、抗生素等補(bǔ)充成分；培養(yǎng)基使用前需預(yù)熱至37℃。

接種密度控制：原代細(xì)胞接種密度不宜過(guò)低，否則細(xì)胞難以分泌足夠的自分泌因子支持生長(zhǎng)，一般接種密度為1×10?-5×10?細(xì)胞/cm2；接種后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布。

培養(yǎng)環(huán)境監(jiān)控：保持培養(yǎng)箱內(nèi)37℃、5%CO?的恒定環(huán)境，定期檢查培養(yǎng)基顏色變化（變黃說(shuō)明pH下降，需及時(shí)換液）；原代細(xì)胞貼壁前避免頻繁晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，貼壁后通常每2-3天換液一次。