細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔乳腺上皮細(xì)胞分離自乳腺組織；乳腺是復(fù)管泡狀皮膚腺，主要由腺上皮細(xì)胞組成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，導(dǎo)管末梢發(fā)育成腺泡；近年來(lái)的許多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的發(fā)生都與乳腺上皮細(xì)胞(MEC)有密切聯(lián)系，體外分離培養(yǎng)MECs即成為研究開(kāi)展的關(guān)鍵步驟。乳腺是乳房的腺體組織，乳腺由導(dǎo)管和腺泡組成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常發(fā)育是由體內(nèi)激素和局部合成的生長(zhǎng)因子共同調(diào)控，其中乳腺表達(dá)的生長(zhǎng)因子對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖、分化、凋亡產(chǎn)生極大的影響。乳腺上皮細(xì)胞分離自分娩后3-5天的乳腺組織，為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞，呈多角形、圓形以及短梭形；乳腺上皮細(xì)胞主要功能即生乳功能。

產(chǎn)品信息：

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的兔乳腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱(chēng)：兔乳腺上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：乳腺組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
凍存復(fù)蘇：

凍存的梯度降溫：

逐步降溫：細(xì)胞凍存時(shí)，先在4℃放置30分鐘，再在-20℃放置1小時(shí)，隨后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過(guò)夜，最后放入液氮長(zhǎng)期保存，避免溫度驟變導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶形成。

標(biāo)記清晰：凍存管上需標(biāo)記細(xì)胞名稱(chēng)、代次、凍存日期和操作者姓名，避免后續(xù)復(fù)蘇時(shí)混淆。

復(fù)蘇的快速操作：

解凍后立即離心：細(xì)胞解凍后迅速轉(zhuǎn)移至含預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心去除含DMSO的凍存液，減少DMSO對(duì)細(xì)胞的毒性。

復(fù)蘇后靜置培養(yǎng)：復(fù)蘇后的細(xì)胞接種后，24小時(shí)內(nèi)不要換液，讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間恢復(fù)狀態(tài)，24小時(shí)后再更換新鮮培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞培養(yǎng)：

培養(yǎng)基選擇：根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇專(zhuān)用培養(yǎng)基，如上皮細(xì)胞用上皮細(xì)胞培養(yǎng)基、成纖維細(xì)胞用成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基，必要時(shí)添加血清（胎牛血清FBS常用，濃度10%-20%）、生長(zhǎng)因子、抗生素等補(bǔ)充成分；培養(yǎng)基使用前需預(yù)熱至37℃。

接種密度控制：原代細(xì)胞接種密度不宜過(guò)低，否則細(xì)胞難以分泌足夠的自分泌因子支持生長(zhǎng)，一般接種密度為1×10?-5×10?細(xì)胞/cm2；接種后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布。

培養(yǎng)環(huán)境監(jiān)控：保持培養(yǎng)箱內(nèi)37℃、5%CO?的恒定環(huán)境，定期檢查培養(yǎng)基顏色變化（變黃說(shuō)明pH下降，需及時(shí)換液）；原代細(xì)胞貼壁前避免頻繁晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，貼壁后通常每2-3天換液一次。

公司正在出售的產(chǎn)品：