產(chǎn)品介紹：
該試劑盒主要用于對蝦養(yǎng)殖業(yè)中，針對對蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒（Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus, IHHNV）的特異核酸片段進行快速擴增與檢測。IHHNV是全球?qū)ξr養(yǎng)殖中主要的病毒病原之一，該試劑盒基于恒溫熒光檢測技術(shù)，可實現(xiàn)對蝦苗種、親蝦及養(yǎng)殖環(huán)境水體中病毒的快速篩查，為IHHNV感染的早期診斷和防控提供可靠工具。
產(chǎn)品名稱 | 對蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒（IHHNV）核酸檢測試劑盒（恒溫熒光法） | 貨號 | AP3500 |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR | 規(guī)格 | 50T |
?? 病毒背景與檢測意義
病毒簡介：IHHNV（又稱對蝦細小病毒）屬于細小病毒科，是一種單鏈DNA病毒。它是已知對蝦病毒中顆粒最小的一種，直徑約22nm。
危害特征：
對藍對蝦（Litopenaeus stylirostris）可引起高達90%的死亡率。
對南美白對蝦（Litopenaeus vannamei）主要引起“矮小畸形癥候群”（Runt-deformity syndrome, RDS），表現(xiàn)為生長緩慢、個體差異大、額角彎曲、尾扇變形等，雖不直接導(dǎo)致高死亡率，但會造成高達50%的經(jīng)濟損失。
傳播途徑：主要通過帶毒蝦、污染水體進行水平傳播，也可通過親蝦進行垂直傳播。
?? 檢測原理與核心優(yōu)勢
該試劑盒采用的是恒溫熒光檢測技術(shù)（通常為LAMP或RPA原理）。
核心原理：針對IHHNV病毒基因組中的保守核酸序列（如NS1基因或非編碼區(qū)）設(shè)計特異性引物。在恒溫條件下（通常為60℃-65℃），利用鏈置換DNA聚合酶對目標片段進行擴增。隨著DNA的合成，反應(yīng)體系中的熒光染料（如SYTO-9）嵌合到雙鏈DNA中發(fā)出熒光，或通過pH值變化引起熒光信號改變，儀器實時監(jiān)測熒光信號的變化，從而實現(xiàn)對病毒核酸的定性檢測。
自動判讀：儀器會根據(jù)熒光曲線的拐點（Tt值）自動判讀結(jié)果，無需人工分析電泳圖譜。
主要優(yōu)勢：
操作快速：整個檢測過程通常僅需45-60分鐘，無需復(fù)雜的熱循環(huán)。
高靈敏度：檢出限可達1×103 拷貝/毫升，能夠檢測出極低含量的病毒。
高特異性：引物針對IHHNV特有序列設(shè)計，與其他對蝦病原（如WSSV、MBV等）無交叉反應(yīng)。
設(shè)備便攜：僅需恒溫熒光檢測儀（如Genie系列等），適合養(yǎng)殖場現(xiàn)場快速篩查。
?? 產(chǎn)品性能指標
根據(jù)相關(guān)產(chǎn)品信息，該試劑盒通常具備以下指標：
指標項目 性能參數(shù)參考
檢測范圍 2×103 ~ 1×10? 拷貝/毫升 (Copies/mL)
最低檢測限 1×103 拷貝/毫升
反應(yīng)時間 45 min
反應(yīng)溫度 60℃ - 63℃
適用儀器 Genie II, Dhelix 1610/3210, ESE Tube Scanner, Deaou-308c等恒溫熒光檢測儀
適用樣本 對蝦組織（鰓、肝胰腺、肌肉）、蝦苗、親蝦、養(yǎng)殖水體等
?? 主要組分與儲存
試劑盒通常包含以下組分（以48T規(guī)格為例）：
反應(yīng)液 (A)：含有dNTPs、緩沖液、Mg2?等。
酶液 (B)：含有Bst DNA聚合酶等。
熒光染料 (C)：顯色液。
陰性對照 (NG)：非IHHNV核酸或水。
陽性對照 (PG)：含有IHHNV基因片段的質(zhì)?；驑藴蔇NA。
儲存條件：所有組分應(yīng)于 -20℃ 條件下避光保存，有效期通常為 12個月。運輸過程需使用干冰或冰袋，避免反復(fù)凍融。
?? 標準操作流程
樣本處理與DNA提取
采集待檢測的對蝦組織（如鰓、肝胰腺）或水體樣本。
使用CTAB法或商品化的基因組DNA提取試劑盒，提取樣本的基因組DNA作為模板。
試劑準備
將試劑完全解凍，各組分在使用前需渦旋混勻，并瞬時離心。
計算所需反應(yīng)管數(shù)量（待檢樣品數(shù) + 陰性對照 + 陽性對照）。
反應(yīng)體系配置
在冰上操作，按說明書比例配制反應(yīng)體系（通常為25 μL）。
將配制好的反應(yīng)液分裝至PCR管中。
上機擴增與檢測
將配置好的反應(yīng)管放入恒溫熒光檢測儀中。
設(shè)置反應(yīng)溫度為63℃，反應(yīng)時間為45 min。
儀器實時監(jiān)測熒光信號變化，并自動判讀結(jié)果。
結(jié)果判讀
陽性：熒光曲線呈典型的“S”型增長，且Tt值（Threshold Time）≤ 45 min。
陰性：熒光曲線為直線或輕微斜線，無“S”型擴增曲線，或Tt值無定義。
?? 注意事項
防止污染：實驗應(yīng)嚴格分區(qū)（試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增區(qū)），避免氣溶膠污染。
操作規(guī)范：試劑配制和加樣步驟建議在冰上進行，避免酶活性損失。反應(yīng)液對光敏感，應(yīng)避光保存和使用。
質(zhì)控要求：每次實驗必須設(shè)置陰性對照（無模板）和陽性對照。若陰性對照出現(xiàn)陽性擴增或陽性對照無擴增，則本次實驗結(jié)果無效。
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人H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)核酸檢測試劑盒 | 魚黃體生成素(LH)核酸檢測試劑盒 |
注意事項
防污染操作
需在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)獨立操作，使用帶濾芯吸頭及專用實驗服。
陽性對照管理
濃度高達1×10?拷貝/μL，需單獨存放并避免污染其他試劑。
局限性
僅限科研使用，不可用于臨床診斷；
環(huán)境樣本中可能存在PCR抑制劑，需設(shè)置內(nèi)參對照。
關(guān)鍵字： 對蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒 ;IHHNV;核酸檢測試劑盒;恒溫熒光法;
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