產(chǎn)品介紹：
該試劑盒主要用于對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)中兩種重大病毒病的同步檢測(cè)，能夠顯著提高檢測(cè)效率、降低檢測(cè)成本。
產(chǎn)品名稱 | 對(duì)蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）/對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒（IHHNV）雙重核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法） |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR |
規(guī)格 | 48T |
貨號(hào) | AP3581 |
?? 產(chǎn)品核心信息
檢測(cè)對(duì)象：
對(duì)蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）：引起白斑病，發(fā)病急、死亡率高。
對(duì)蝦傳染性皮下及造血組織壞死癥病毒（IHHNV）：引起矮小畸形綜合征（Runt-Deformity Syndrome, RDS），影響生長(zhǎng)并導(dǎo)致畸形。
檢測(cè)原理：雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Duplex qPCR），采用TaqMan熒光探針技術(shù)。試劑盒在同一反應(yīng)管中同時(shí)加入兩對(duì)特異性引物和兩條不同熒光標(biāo)記（如FAM和VIC/HEX）的探針，分別靶向WSSV的保守基因（如VP28）和IHHNV的保守基因（如NS1或非編碼區(qū)）。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)：
高特異性：探針與靶序列特異性結(jié)合，避免交叉反應(yīng)。
高效率：一次反應(yīng)同時(shí)檢測(cè)兩種病毒，節(jié)省時(shí)間和樣本。
靈敏度：最低檢測(cè)限通?？蛇_(dá) 1×103 copies/mL。
適用樣本：對(duì)蝦的肝胰腺、鰓、血淋巴組織，或水體環(huán)境樣本。
?? 產(chǎn)品組成與規(guī)格
組分名稱 規(guī)格示例 說明
2×qPCR反應(yīng)預(yù)混液 800 μL (管) 預(yù)混了dNTPs、緩沖液、Mg2?等核心成分。
WSSV/IHHNV引物探針混合液 100 μL (管) 含兩對(duì)引物及兩條不同標(biāo)記的探針（FAM檢測(cè)WSSV，VIC/HEX檢測(cè)IHHNV）。
酶混合物 (Enzyme Mix) 100 μL (管) 含熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶，需-20℃保存。
陽(yáng)性對(duì)照 (Positive Control) 50 μL (管) 含WSSV和IHHNV目標(biāo)基因片段的混合質(zhì)粒。
陰性對(duì)照 (Negative Control) 1 mL (管) 無(wú)菌雙蒸水或緩沖液。
?? 操作流程簡(jiǎn)述
樣本采集與處理：
組織樣本：取對(duì)蝦的肝胰腺和鰓組織，加入PBS緩沖液研磨勻漿，離心取上清。
保存：若不能立即檢測(cè)，樣本應(yīng)保存在-80℃或液氮中。
DNA提?。?/span>
使用商用基因組DNA提取試劑盒（柱提法/磁珠法）提取樣本中的總DNA。
關(guān)鍵點(diǎn)：IHHNV是單鏈DNA病毒，WSSV是雙鏈DNA病毒，提取時(shí)需確保DNA完整性。
試劑準(zhǔn)備與加樣：
將反應(yīng)液、酶液、引物探針在冰上解凍并充分混勻，離心30秒。
按說明書比例配制反應(yīng)體系（通常為20-25 μL），向反應(yīng)管中加入提取的DNA模板（通常5-10 μL）。
必須設(shè)置：陰性對(duì)照（無(wú)菌水）和陽(yáng)性對(duì)照（試劑盒提供）。
上機(jī)擴(kuò)增：
將反應(yīng)管放入熒光定量PCR儀。
推薦程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)反應(yīng)：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（在此步收集熒光），進(jìn)行40-45個(gè)循環(huán)。
結(jié)果判讀：
WSSV陽(yáng)性：FAM通道Ct值 < 38，且曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)。
IHHNV陽(yáng)性：VIC/HEX通道Ct值 < 38，且曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)。
陰性：對(duì)應(yīng)通道無(wú)Ct值或Ct值 ≥ 40。
質(zhì)控要求：陽(yáng)性對(duì)照在兩個(gè)通道的Ct值均應(yīng)≤35，陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)擴(kuò)增曲線。
?? 注意事項(xiàng)與安全提示
嚴(yán)格分區(qū)操作：為防止氣溶膠污染導(dǎo)致假陽(yáng)性，實(shí)驗(yàn)必須嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)），且各區(qū)物品專用。
試劑保存：試劑盒需在 -20℃ 條件下避光保存。酶混合物對(duì)溫度敏感，應(yīng)避免反復(fù)凍融。
臨床意義：
WSSV：致死率極高（可達(dá)90%以上），需早發(fā)現(xiàn)早處理。
IHHNV：感染后導(dǎo)致蝦生長(zhǎng)緩慢、畸形，嚴(yán)重影響經(jīng)濟(jì)效益。
雙重檢測(cè)有助于全面評(píng)估蝦群健康狀況，制定綜合防控方案。
廢棄物處理：反應(yīng)結(jié)束后，嚴(yán)禁開蓋，以免擴(kuò)增產(chǎn)物（含熒光染料和DNA）污染環(huán)境。應(yīng)將反應(yīng)管密封后作為生物廢棄物處理。
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PCR試劑盒的本質(zhì)與用途：
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是一種基因擴(kuò)增技術(shù)，
用于檢測(cè)或定量特定DNA/RNA序列。其核心是通過溫度循環(huán)（變性、退火、延伸）擴(kuò)增目標(biāo)基因片段，而非培養(yǎng)生物體。
關(guān)鍵點(diǎn)：
無(wú)需培養(yǎng)：PCR直接檢測(cè)樣本中的核酸，無(wú)需預(yù)先培養(yǎng)微生物或細(xì)胞。
應(yīng)用場(chǎng)景：病原體檢測(cè)（如病毒、細(xì)菌）、基因表達(dá)分析、遺傳病診斷等。
關(guān)鍵字： 對(duì)蝦白斑綜合癥病毒;IHHNV雙重; PCR-熒光探針法;核酸檢測(cè)試劑盒;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)是一家化學(xué)、生化和材料科學(xué)等領(lǐng)域的科研用研發(fā)產(chǎn)品的制造商和供應(yīng)商， 我們的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的基礎(chǔ)科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用?？蛻舭▽W(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實(shí)驗(yàn)室以及制藥，生物技術(shù)，化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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