產(chǎn)品定義：
大鼠肌腱細(xì)胞是構(gòu)成大鼠肌腱的主要細(xì)胞成分，呈紡錘形。它主要負(fù)責(zé)合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)，維持肌腱的結(jié)構(gòu)和力學(xué)性能，同時(shí)可感知力學(xué)刺激，調(diào)節(jié)肌腱的適應(yīng)性重塑，在肌腱損傷修復(fù)、肌腱病發(fā)生發(fā)展及肌腱組織工程研究中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠肌腱細(xì)胞 | 產(chǎn)品貨號(hào) | P-X1677 |
英文名稱 | Rat tendon cell | 規(guī)格 | 5×10^5 |
報(bào)告 | 提供免疫熒光鑒定報(bào)告 | 組織來源 | 肌腱組織 |
產(chǎn)品簡介：
細(xì)胞詳述
肌腱細(xì)胞是肌腱組織的基本功能單位，主要合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和糖蛋白基質(zhì)，維持肌腱組織的新陳代謝。
肌腱損傷后的yu合方式包括內(nèi)源性yu合和外源性yu合，而理想的yu合方式是控制外源性yu合，促進(jìn)內(nèi)源性yu合。內(nèi)源性yu合的機(jī)制是肌腱細(xì)胞通過細(xì)胞自身的增殖從而促進(jìn)肌腱yu合，但目前肌腱細(xì)胞在體外經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后會(huì)喪失分裂增殖能力。
目前已知多種因素影響肌腱yu合過程，其中與肌腱yu合關(guān)系密切的有著重要調(diào)控作用的細(xì)胞因子主要有：堿性成纖維生長因子，轉(zhuǎn)化生長因子 β，骨形態(tài)發(fā)生蛋白-12，血管內(nèi)皮生長因子，胰島素樣生長因子-1，血小板源性生長因子等。
細(xì)胞特性
1) 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肌腱組織。
2) 細(xì)胞鑒定：Ⅰ型膠原免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf 原代肌腱 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞傳代：
傳代時(shí)機(jī)判斷
細(xì)胞匯合度達(dá)到80%-90%時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞過度匯合導(dǎo)致接觸抑制，影響增殖能力
觀察細(xì)胞狀態(tài)：細(xì)胞形態(tài)正常，無明顯漂浮、污染跡象
消化環(huán)節(jié)控制
消化前準(zhǔn)備：吸出舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細(xì)胞1-2次，去除血清（血清會(huì)抑制胰蛋白酶活性）
消化液選擇：同原代分離，根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的消化酶，胰蛋白酶消化時(shí)間一般為1-5分鐘，膠原酶消化時(shí)間為10-30分鐘
消化終止：顯微鏡下觀察到細(xì)胞回縮變圓、間隙增大時(shí)，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，血清濃度不低于10%
細(xì)胞吹打：用移液器輕輕吹打細(xì)胞，避免過度用力導(dǎo)致細(xì)胞破裂，吹打次數(shù)一般為10-15次
傳代比例控制
傳代比例根據(jù)細(xì)胞生長速度調(diào)整：生長速度快的細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞）可按1:3-1:6傳代，生長速度慢的細(xì)胞（如內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞）按1:2傳代
首次傳代比例可適當(dāng)提高（如1:2），待細(xì)胞適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境后再調(diào)整為常規(guī)比例
傳代后培養(yǎng)
接種后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
24小時(shí)內(nèi)不要晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，避免細(xì)胞貼壁不牢
培養(yǎng)24-48小時(shí)后觀察細(xì)胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，去除未貼壁的死細(xì)胞和細(xì)胞碎片
細(xì)胞分離與接種：
酶消化的“度”：酶液濃度和消化時(shí)間需精準(zhǔn)控制，如胰蛋白酶濃度通常為0.25%，消化時(shí)間5-15分鐘（根據(jù)組織類型調(diào)整），消化期間每隔3-5分鐘輕輕晃動(dòng)容器，鏡下觀察到細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí)，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。
吹打力度適中：用巴氏吸管吹打細(xì)胞懸液時(shí)，避免用力過猛產(chǎn)生大量氣泡，以吹打后細(xì)胞懸液呈均勻霧狀為宜，一般吹打10-15次即可，過度吹打會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂。
接種密度適配：根據(jù)細(xì)胞增殖速度調(diào)整接種密度，增殖快的細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞）可適當(dāng)降低密度，增殖慢的細(xì)胞（如神經(jīng)元）需提高接種密度，確保細(xì)胞能相互支持生長。
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關(guān)鍵字： 大鼠肌腱細(xì)胞;梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞;貼壁;
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