血鋅濃度檢測(cè)試劑盒(PAPS法)說(shuō)明書(shū)

                                                  微量法

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義：

鋅是一種必需的微量金屬，僅次于鐵。它存在于鋅金屬酶中，例如碳酸酐酶、堿性磷酸酶、R.N.A和D.N.A聚合酶、噻啶激酶、羧肽酶和醇脫氫酶。人類(lèi)缺乏鋅可能導(dǎo)致兒童皮膚病變、易怒、脫發(fā)和生長(zhǎng)遲緩。鋅不足與免疫功能受損有關(guān)。

測(cè)定原理：

硝基-PAPS 在堿性溶液中與 Zn 反應(yīng)，生成紫色的復(fù)合物，在570nm處有最大的吸收峰。Cu 和鐵離子的干擾可以通過(guò)調(diào)節(jié)pH值和添加鏊合物完全消除，

組成：

自備儀器和用品：

酶標(biāo)儀、離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、96孔板、蒸餾水。

樣本制備：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取2個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免樣本和試劑浪費(fèi)！

1.血清：標(biāo)本4℃保存可穩(wěn)定一周。

2.樣本中甘油三酯≤1000mg/dL、膽紅素≤50mg/dL、VC≤100mg/dL、Cu2*≤60μmol/L、Fe3*≤60μmol/L、Ca2≤5mmol/L、Mg2≤4mmol/L時(shí)未觀察到明顯干擾。

上機(jī)檢測(cè)：

1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到570nm。

2.提前取出所有試劑，解凍至室溫，在96孔板中依次加入：

注：1.若A測(cè)定值大于1.5，可用生理鹽水或蒸餾水對(duì)樣本進(jìn)行稀釋?zhuān)♂尡稊?shù)D代入計(jì)算公式。

2.若ΔA(A測(cè)定管－A空白管)值小于0.08，可增加樣體積V1（如由80μl增至100μl，空白管由80μl增加至100μl，標(biāo)準(zhǔn)管是80μl標(biāo)準(zhǔn)品和20μl蒸餾水；其他試劑均保持不變）。則改變后的V1代入公式重新計(jì)算。

3. 檢測(cè)出的ΔA(A測(cè)定管－A空白管)應(yīng)在0.8--0.0.08線性范圍之間，結(jié)果較為準(zhǔn)確。

血鋅濃度計(jì)算公式：

血鋅(Zn)(μmol/L) = (C 標(biāo)準(zhǔn)×V2)×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷V1×D 

= 36.7×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D

血鋅(Zn)(μg/dL) = (C 標(biāo)準(zhǔn)×V2)×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)÷V1×6.51×D 

= 238.9×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×D 

C 標(biāo)準(zhǔn)--標(biāo)品濃度，36.7μmol/L；  V1--加入樣本體積，0.08mL；V2--加入標(biāo)準(zhǔn)品體積，0.08mL；  W--質(zhì)量，g；  D--稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。