施氏油脂線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 施氏油脂線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Steinernema carpocapsae Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4017 |
產品用途
僅供科研使用，適用于施氏油脂線蟲（Elaeophora schneideri）的快速、靈敏檢測。
產品特點
即開即用：用戶僅需提供樣品DNA/RNA模板，無需額外優(yōu)化引物或探針。
高靈敏度與特異性：
引物及探針針對施氏油脂線蟲高度保守區(qū)設計，避免與其他病原體核酸交叉反應。
檢測限低至10^2拷貝/μL，線性范圍覆蓋5個數(shù)量級（10^2-10^7拷貝/μL）。
內置對照系統(tǒng)：
提供預稀釋的DNA片段作為陽性對照（非活體樣品），便于排除假陰性結果。
雙重檢測模式：支持定性和定量分析，兼容染料法熒光定量PCR平臺。
試劑盒組分
主反應混合液：含dNTPs、緩沖液、熱啟動DNA聚合酶、熒光染料。
引物探針混合液：優(yōu)化后的特異性引物及探針（凍干粉或預混液）。
陽性對照：1×10^8拷貝/μL的DNA片段（需按說明書稀釋使用）。
陰性對照：無核酸酶水。
模板稀釋液：用于標準品梯度稀釋。
實驗步驟
1. 陽性對照稀釋（示例：6個梯度）
注意事項：操作需在獨立潔凈區(qū)域進行，避免污染。
步驟：
a. 標記離心管（7-2號），每管加45μL模板稀釋液。
b. 7號管加入5μL原液（10^8拷貝/μL），震蕩混勻得10^7拷貝/μL，依次稀釋至10^2拷貝/μL。
2. PCR反應體系配制（20μL/反應）
| 組分 | 體積（μL） |
| 主反應混合液 | 10 |
| 引物探針混合液 | 2 |
| 模板DNA/稀釋對照 | 2 |
| 無核酸酶水 | 6 |
3. 擴增程序
| 步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預變性 | 95 | 5 min | 1 |
| 變性 | 95 | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60 | 30 sec | |
結果分析
定量檢測：以Ct值與標準曲線計算模板拷貝數(shù)。
定性檢測：根據(jù)擴增曲線和熔解曲線判定陽性/陰性。
注意事項
避免反復凍融試劑，分裝后使用。
實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理。
不同試劑盒組分可能存在差異，請以實際說明書為準。
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關鍵字： 施氏油脂線蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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