禽沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 禽沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Avian Salmonella spp. Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4041 |
檢驗(yàn)原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對(duì)禽沙門氏菌（Salmonella gallinarum）基因組高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物。通過(guò)熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核酸擴(kuò)增過(guò)程，實(shí)現(xiàn)定性及定量檢測(cè)。擴(kuò)增過(guò)程中，熒光信號(hào)強(qiáng)度與目標(biāo)DNA含量成正比，經(jīng)儀器分析輸出結(jié)果。
試劑組成
| 成分 | 規(guī)格 |
| 禽沙門氏菌擴(kuò)增液 | 50μL × 1管 |
| 禽沙門氏菌反應(yīng)液 | 950μL × 1管 |
| 陽(yáng)性質(zhì)控品（DNA片段）| 50μL × 1管（1×10^8拷貝/μL） |
| 陰性質(zhì)控品（超純水）| 50μL × 1管 |
保存條件與有效期
保存溫度：-20℃避光保存。
有效期：12個(gè)月（未開封狀態(tài)下）。
操作步驟
樣品DNA制備
使用常規(guī)方法提取待測(cè)樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
陽(yáng)性對(duì)照稀釋（可選標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）
將陽(yáng)性質(zhì)控品按10倍梯度稀釋（10^2–10^7拷貝/μL），獨(dú)立操作避免污染。
PCR反應(yīng)體系配制
每20μL反應(yīng)體系包含：
10μL 2×qPCR Mix（含SYBR Green染料）
2μL 引物混合液
2μL 模板DNA（樣品或?qū)φ眨?/span>
6μL 超純水
擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（熒光采集）；
熔解曲線分析：60–95℃（每0.5℃遞增）。
結(jié)果判讀
陽(yáng)性：Ct值≤35，且熔解曲線峰值與對(duì)照一致；
陰性：無(wú)Ct值或Ct值＞38。
注意事項(xiàng)
試劑開封后需分裝保存，避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)區(qū)域需嚴(yán)格分區(qū)（試劑配制、樣本處理、擴(kuò)增區(qū)），防止交叉污染。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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