亞利桑那沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱 | 亞利桑那沙門氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Salmonella arizonae Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4046 |
檢驗原理
本試劑盒采用SYBR Green染料法實時熒光PCR技術，針對亞利桑那沙門氏菌基因組高度保守區(qū)域設計特異性引物，通過熒光信號實時監(jiān)測核酸擴增過程，實現(xiàn)定性或定量檢測。陽性對照為無傳染性DNA片段，避免生物安全風險。
試劑組成
亞利桑那沙門氏菌擴增液（50μL×1管）
亞利桑那沙門氏菌反應液（950μL×1管）
陽性質控品（1×10^8拷貝/μL，50μL×1管）
陰性質控品（50μL×1管）
說明書（1份）
儲存條件及有效期
-20℃±5℃避光保存，運輸需冰袋密封，避免反復凍融（≤7次），有效期12個月。
適用儀器
兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等熒光定量PCR儀。
自備耗材
無DNA/RNA酶的1.5mL離心管、0.2mL PCR反應管、濾芯吸頭（10μL/200μL/1000μL）、離心機、移液器等。
樣本要求
采集：按常規(guī)方法采集胃液分泌物、嘔吐物或培養(yǎng)物，避免交叉污染。
保存：短期-20℃，長期-70℃（不超過6個月），運輸需2~8℃冰袋。
檢測方法
樣本處理
按規(guī)范提取DNA，建議使用商業(yè)提取試劑盒。
陽性對照需獨立操作，避免污染。
標準曲線制備（定量檢測）
以10倍梯度稀釋陽性對照（10^2~10^7拷貝/μL），繪制Ct值與log濃度標準曲線。
PCR擴增
反應體系：20μL（含模板DNA、反應液、擴增液）。
擴增參數(shù)（需優(yōu)化）：
預變性：95℃ 2分鐘
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)，熒光采集）
結果判讀
定性檢測：
陰性對照Ct≥40，陽性對照Ct≤30且擴增曲線典型。
樣本Ct≤35為陽性，≥40為陰性；35<Ct<40需復測。
定量檢測：根據(jù)標準曲線計算樣本DNA濃度。
注意事項
不同批號試劑不可混用。
操作分區(qū)（試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)）避免污染。
實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理。
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關鍵字： 亞利桑那沙門氏菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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