產(chǎn)品基本信息
產(chǎn)品名稱 | 乙型肝炎病毒B型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Hepatitis B Virus Genotype B Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR3947 |
用途：基于探針法熒光定量PCR原理，定性或定量檢測樣本中乙型肝炎病毒（HBV）B型DNA，線性范圍至少5個數(shù)量級，分析靈敏度可達100拷貝/反應。
適用性：僅用于科研，不可用于臨床診斷，適配ABI、Bio-Rad等主流熒光定量PCR儀。
規(guī)格組成：含PCR反應液、陽性對照（1×10?拷貝/μL）、引物混合物等，足夠50次20μL體系反應。
操作流程
DNA提取 自選方法純化樣品DNA，與多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。 樣本制備區(qū)獨立操作，避免交叉污染。
標準曲線稀釋 1. 6個離心管標記2-7號，各加45μL DEPC-H?O；
2. 7號管加5μL陽性對照（1×10?拷貝/μL），梯度稀釋至1×102拷貝/μL 。 使用帶芯槍頭，稀釋操作需在獨立區(qū)域進行，防止污染試劑。
試劑配制 按N+2（樣品+陰性對照+6個陽性對照）準備qPCR管，添加反應試劑（具體成分需見說明書）。 試劑準備區(qū)操作，嚴格按比例混合。
模板添加 每管加2μL模板，順序為陰性對照→待測樣品→陽性對照，離心30秒。 加樣后立即進行擴增，避免反復凍融。
擴增反應 PCR程序需參考說明書（如95℃預變性、40 cycles擴增等）。 儀器樣品槽需對應標記，確保結果準確。
結果分析規(guī)則
定量檢測：以陽性對照濃度log值為橫軸、Ct值為縱軸繪制標準曲線，推算樣品DNA濃度。
定性檢測：陰性對照Ct值≥38或無Ct值；陽性對照Ct值<38且有明顯擴增曲線；待測樣品Ct值<38判定為陽性。
污染排查：陰性對照出現(xiàn)擴增曲線提示污染，需重新實驗。
運輸與保存要求
運輸：低溫運輸，避免反復凍融。
保存：-20℃避光保存，有效期1年，陽性對照需單獨存放以防污染其他試劑。
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關鍵字： 乙型肝炎病毒B型;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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